- ￥678
- 翌圣生物（Yeasen）
- 14651ES80
- 上海
- 2026年02月02日
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- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
T4 RNA Ligase 1
- 保质期：
有效期1个月
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-25~-15℃保存
- 规格：
1000U
产品信息
| 货号 | 14651ES80/ 14651ES90 |
| 规格 | 1,000 U / 5,000 U |
| 单位定义 | 在37℃条件下，30分钟内将1 nmol 的5 -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量定义为1 U。 |
| 来源 | 大肠杆菌表达的来源为T4嗜菌体的重组蛋白 |
| 推荐反应条件 | 10×T4 RL1 Reaction Buffer：500 mM Tris-HCl (pH 7.5 at 25℃)，100 mM MgCl2，20 mM DTT；最适37℃孵育。 |
| 失活条件 | 65℃加热15 min或煮沸2 min可使T4 RNA Ligase 1失活/加入终浓度50 mM EDTA pH 8.0可使T4 RNA Ligase 1反应终止。 |
| 组分编号 | 组分名称 | 14651ES80 | 14651ES90 |
| 14651-A | T4 RNA Ligase 1 (10 U/μL) | 100 μL | 500 μL |
| 14651-B | 10×T4 RL1 Reaction Buffer | 200 μL | 1 mL |
储存条件-25~-15℃保存，有效期2年。
使用说明1. 单链RNA的环化连接反应参考下表在冰浴中配制如下反应体系
| 组分 | 使用量（μL） |
| 10×T4 RL1 Reaction Buffer | 2 |
| 1 mM ATP | 1 |
| 单链RNA (20 μM) | 0.5 |
| PEG-8000 (50%) | 8 |
| T4 RNA Ligase 1 (10 U/μL) | 1 |
| DEPC水 | Up to 20 |
| 组分 | 使用量（μL） |
| 10×T4 RL1 Reaction Buffer | 2 |
| 10 mM ATP | 2 |
| 单链RNA (10 μM) | 2 |
| 单链DNA (10 μM) | 2 |
| PEG-8000 (50%) | 8 |
| T4 RNA Ligase 1 | 2 |
| DEPC水 | Up to 20 |
*如果发现效果欠佳可以适当延长连接反应时间或尝试25℃孵育2 h或16℃孵育16 h。
4. 终止反应：65℃孵育15 min或煮沸2 min，即可终止反应。
注意事项1. 本品连接的底物无论是单链RNA还是单链DNA，都需要确保5'末端磷酸化或腺苷酰化，同时3'末端是羟基。
2. 可根据具体应用选择合适的操作方法，需准备额外的试剂，如RNase inhibitor、DEPC水等。
3. 根据连接反应的类型，推荐在反应体系中加入适量的PEG-8000。建议连接单链RNA或DNA的分之间连接反应体系中PEG-8000的终浓度为15%-25%，这样可以显著提高酶活性，同时不影响反应特性。
4. 本产品仅用作科研用途。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20230419
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文献和实验Joining RNA Molecules with T4 DNA Ligase
Researchers interested in studying RNA structure and function or RNA-protein interactions are increasingly using site-specifically modified RNAs to probe sites of interest (1 ). In addition to expanding the repertoire of functional groups
Splint Ligation of RNA with T4 DNA Ligase
Splint ligation of RNA, whereby specific RNA molecules are ligated together, can be carried out using T4 DNA ligase and a bridging DNA oligonucleotide complementary to the RNAs. This method takes advantage of the property of T4 DNA ligase
使RNA的 3′－ OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6． 5． 1． 3．是 J． Hurwitz等（ 1972）从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的，与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理，首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体，复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键，它与 RNA的 3′－ OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
