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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- 库存:
572
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
40000U|200000U
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应T4 DNA连接酶品牌,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:T4 DNA连接酶品牌
编号:YT029
英文名:T4 DNA Ligase
品牌:百奥莱博
规格:40000U|200000U
本酶可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA 连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
用途:T4 DNA Ligase常用于DNA*(代"片")段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5"-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共200单位。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
10×Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。

T4 DNA Ligase连接产物转化感受态后涂板LB平板的效果如上图,本品的连接产物转化感受态细菌后涂板获得的LB平板效果图。A. 双酶切后的载体自连过夜;B. 双酶切后的载体与待插入片段过夜连接。
注意事项:
1. 对于普通的转化大肠杆菌的操作,不必对连接产物进行纯化,连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时,通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯*(代"仿")抽提方法等纯化DNA,然后再进行电转。
2. 需进行平端连接或快速连接时,推荐使用百奥莱博的快速DNA连接试剂盒(YT028/D7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接,但效率较低。
3. 普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察,推荐先在65℃孵育10分钟使T4 DNA Ligase失活,以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
储存条件:-20℃。
我公司的T4 DNA连接酶品牌,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·2×PCR Master Mix(含Taq酶,buffer,dNTP)
编号:YT378
英文名称:2×PCR Master Mix
规格:400次
2X PCR Master Mix中含有2X Taq DNA Polymerase,2X PCR Buffer,2XdNTP,只需加入适量引物、模板和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作,使操作更加快捷,也减少了PCR操作过程中可能导致的污染,使PCR的重复性更好。
利用2X PCR Master Mix可以进行各种常规的PCR扩增,特别适合用于定性和半定量的PCR扩增,以及2kb以下DNA*(代"片")段的T载体克隆。
2X PCR Master Mix可以扩增出长达8kb的片段,但通常更适合用于扩增2kb以下的DNA*(代"片")段。
本产品稳定性高,经测试,反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。
本试剂盒用于50微升的PCR反应体系,足够用于160个反应;用于20微升的PCR反应体系,足够用于400个反应。
注意事项:
1)由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2)Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10-5,对于大于1kb的DNA*(代"片")段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶,例如Pfu DNA polymerase、YT Taq DNA polymerase等。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测,Taq DNA polymerase是最佳选择。
3)尽管本产品经过15次反复冻融后仍具有和冻融前几乎相同的PCR扩增效果,但仍宜适当避免反复冻融本产品,多次反复冻融可能使产品性能下降。
4)使用本产品前,一定要完全融化,并上下颠倒轻轻混匀后才能使用,尽量避免起泡。
储存条件:-20℃。
T4 DNA连接酶品牌关键词:T4 DNA连接酶,YT029,T4 DNA Ligase
·D-乙酰氨基酸水解酶
编号:YT583
英文名称:N-Acyl-D-Amino-Acid Deacylase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的D-乙酰氨基酸水解酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,常用于生产D-型氨基酸。
CAS:65979-42-2
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:N-acyl-D-amino acid + H2O = a carboxylate + D-amino acid
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
·SP6 RNA聚合酶
编号:YT410
英文名称:SP6 RNA Polymerase
规格:500U
本酶来自由大肠杆菌表达,表达基因为嗜菌体SP6 RNA Polymerase基因,是一种高度特异识别SP6启动子序列的DNA依赖的5"→3" RNA聚合酶。SP6 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA SP6启动子下游NTP的掺入,合成与SP6启动子下游的模板DNA互补的RNA。
特点:SP6 RNA Polymerase可以识别修饰的NTP,例如生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP,可以用于各种标记RNA的合成。同时对于SP6启动子有高度的特异性。
用途:用于RNA合成,合成的RNA可以用于或用作:杂交探针,基因组DNA序列分析,核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay),反义RNA合成,作为体外翻译的RNA模板,RNA剪接研究的底物,RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
活性定义:37℃60分钟内,催化1nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),6mM MgCl2,10mM DTT,2mM spermidine,0.5mM NTP,0.6MBq/ml[3H]-ATP,20μg/ml plasmid DNA containing the specific SP6 RNA Polymerase promoter sequence。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:50mM Tris-HCl(pH8.0),150mM NaCl,5mM DTT,0.1mg/ml BSA,0.5mM Elugent,50% glycerol。
Transcription Buffer(5X):200mM Tris-Cl(pH7.9 at 25℃),30mM MgCl2,50mM DTT,50mM NaCl,10mM spermidine。
失活或抑制:70℃加热10分钟可使SP6 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使SP6 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制SP6 RNA Polymerase的活性。
储存条件:-20℃
T4 DNA连接酶品牌关键词:T4 DNA连接酶,YT029,T4 DNA Ligase
·iNOS抑制剂(SMT)(诱导型一氧化氮合成酶抑制剂)
编号:YT277
英文名称:iNOS Inhibitor(SMT)
规格:100mg
本品是iNOS高度选择性抑制剂。对于体外培养巨噬细胞诱导产生的iNOS,EC50=6μM;对于血管平滑肌细胞被诱导产生的iNOS,EC50=2μM。SMT,即S-Methylisothiourea Sulfate,也称2-Methyl-2-thiopseudourea,Sulfate,或S-Methyl-ITU
分子式:(C2H6N2S)2·H2SO4
分子量:278.4
性状:白色结晶
纯度:>99%
注意事项:如果配制成水溶液,分装后-20℃保存,半年有效。
储存条件:室温,有效期2年。
·小鼠抗CD44抗体
编号:YT699
英文名称:CD44 Mouse Monoclonal Antibody
规格:50μl
本品为来源于小鼠的抗CD44的单克隆抗体。
宿主:小鼠
克隆性:单克隆抗体
用途:WB,FCM,IHC
交叉反应性:人
分子量:80KDa
推荐稀释比例:WB(1:500-1:1000),IHC(1:200),FCM(1:100-1:200)
| About this Antibody | |
| Name | CD44 Mouse Monoclonal Antibody |
| Category | Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody |
| Isotype | IgM |
| Purification | ProA affinity purified |
| About the Immunogen | |
| Immunogen | This antibody is produced by immunizing mice with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to a region of CD44. |
| Gene ID | 960 |
| SwissProt | P16070 |
| Synonyms | CDW44; CSPG8; ECMR-III; HCELL; IN; LHR; MC56; MDU2; MDU3; MGYT1778; MIC4; MUTCH-I; Pgp1 |
| Category | Immunology and Inflammation |
| Background | CD44 is a cell-surface glycoprotein postulated to play a role in a variety of biological processes, including lymphocyte homing and tumor-cell metastasis. It mediates cell-cell and cell-matrix interactions through its affinity for hyaluronic acid (HA), and possibly also through its affinity for other ligands such as osteopontin,collagens, and matrix metalloproteinases (MMPs). Adhesion with HA plays an important role in cell migration, tumor growth and progression. CD44 is highly polymorphic, possesses a number of alternative splice variants and undergoes extensive post-translational modifications. |
注意事项:
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
相关专题 重组DNA技术工具酶 连接酶旧称“合成酶”。DNA连接 酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。 DNA连接 酶
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