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一年
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钦诚生物
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-20°保存
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10ml
于加入到 RNA 提取、FISH 和 Microdissection 等缓冲液中保护 RNA 分子的完整性。
RVC 尤其适合于抑制植物中的 RNase。
1. 抑制 RNase 活性,RVC 能抑制动物、植物和真菌的各种 RNase 的活性,Ki 值为
10 微摩尔,加入到 RNA 提取液中能明显改善 RNA 提取效果。
2. 与蛋白质的 RNase inhibitor 相比,其保存不需要 DTT。
3. 性价比高于 RNase inhibitor。
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文献和实验等在高压下蒸汽灭菌15min(1.034 X 105 Pa) 2. 焦碳酸二乙酯(DEPC)抑制法:DEPC是RNA酶的强烈抑制剂,塑料或玻璃器皿在含0.1%的DEPC溶液中浸泡2h,然后以灭菌水淋洗数次,在100 ºC下干烤15min。 3. RNA酶抑制剂法:利用RNA酶蛋白质抑制剂与RNA酶紧密结合防止其发挥酶活作用;利用氧钒核糖核苷复合物与RNA酶结合;利用硅藻土吸附RNA酶。 一、细菌RNA的制备 1.菌体培养 同上
试剂,而且它并不干扰反转录或mRNA在无细胞体系中的翻译。(二)氧钒核糖核苷复合物 这种由氧钒(1V)离子和4种核糖核苷之中的任意一种所形成的复合物,是量种过渡态类似物,它能与多种RNA酶结合并几科能百分之百地抑制RNA酶的活性。这4种氧钒核糖核苷复合物可加入完整细胞中,在RNA提取和纯化的所有过程中,其使用浓度都是10mmol/L.所得到的mRNA可直接在硅卵母细胞中进行翻译, 并能作为某些外酶促反应(如mRNA反转录)的模板。然而氧钒核糖核苷复合物强烈抑制mRNA在无细胞体系中的翻译,因此必须用含
,贮存于-20℃。抑制剂制品冻融数次后或放置在氧化条件下即应弃之不用,因为上述处理会使蛋白质变性从而释放出所结合的RNA酶。因此,在使用变性剂裂解哺乳动物细胞提取RNA的初始步聚中不应使用这种蛋白抑制剂。然而采用更温和的裂解方法时应使用这种抑制剂,并且在后续的所有RNA纯化步骤中均应有此蛋白质存在。由于酚抽提可以除蛋白质抑制剂,故应在纯化过程中补加几次抑制剂。其最大活性的发挥要求巯基试剂,而且它并不干扰反转录或mRNA在无细胞体系中的翻译。 (2)氧钒核糖核苷复合物:这种由氧钒(1V)离子和4种
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