细菌RNAout

细菌RNAout

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  • ¥390
  • 钦诚生物
  • QC51102
  • 上海
  • 2025年07月13日
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    • 技术资料
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      大量

    • 保质期

      一年

    • 保存条件

      4°保存

    • 规格

      100次

      本产品是在 RNAout 基础上根据细菌提取的具体情况改良而得。它基于异硫酸胍/酚/氯仿提取RNA 原理,可用于包括 E.coli、Campylobacter fetus、Pseudomonas aeruginosa、Rhodobacter sphaeroides 等各种常见的革氏阴性细菌。如果需要提革氏阳性细菌(如 Bacillus subtilis、Staphylococcus aureus 等)的 RNA,可以选择真菌 RNAout。本产品特点如下:
    1. 操作简单快速,只要十分钟左右,可以全在室温下进行。
    2. 所得 RNA 质量高,OD260/OD280 一般在 1.9,不含基因 DNA 污染。
    3. 灵敏度高,可以从一个菌落中提取到普通电泳能够检测到的总 RNA。
    4. 性价比高于进口同类产品。
        成分 编号 100 次包装 250 次包装  
    细 菌 RNAout 51102 100 mL 250 mL
    使用手册 1 份
      常温运输,4℃保存,有效期一年。
       
     
    1. 在 1.5 mL 塑料离心管中离心收集 0.2-1.5 mL  新鲜细菌(注意:由于细菌RNA 半衰期十分短,所以,必须使用最新鲜细菌),吸尽液体培养基,加 入1 mL 细菌 RNAOUT 并用枪充分吹打,确保细菌全部裂解,没有块状 物。如果使用菌落,则用接种环小心将其转移到装有 1 mL 细菌 RNAOUT 的
    1.5 m 塑料离心管中,用移液枪吹打均匀。在细菌数较少时,建议使 用天泽基因的助沉剂 RNADOWN 以提高 RNA 回收率。
    1. 加入 0.2 mL 氯仿,在振荡器上充分振荡混均 30 秒(必须将管底的液体振荡起来,否则不能有效将 DNA 打断和去除蛋白质)。
    2. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟。上清液无色,下层液呈篮色,中间为  蛋白质。小心将上清液转移到另一干净 1.5 m 塑料离心管中,上清液体 积约为 0.6 mL。为避免触及中间层的 DNA 和蛋白质,建议分小量多次 吸取,并且只取 0.5 mL,留 0.1 mL 左右。当细菌数量较少时,中间层 十分松散,上清时很容易吸到下层有机相,需要更加小心。
    3. 在上清液中加入等体积,振荡器上振荡混均 30 秒。
    4. 12000-15000 室温离心 3-10 分钟,RNA 将在管底侧面形成沉淀。
    5. 小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA 沉淀。
     
    7. 在离心管中加入 1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均 30 秒。
    8. 12000-15000 g 室温离心 1 分钟。
    1. 小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA 沉淀。
    2. 重复第 8 到第 10 步一次。
    3. 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留液(约  50 uL)。
    4. 短暂放 1-2 分钟后加入适量 RNA 溶解液使 RNA 沉淀溶解,可以立即使用或存放于-80℃长期保存。
    5. RNA 完整性的电泳检测:

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