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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
基本信息
| 别名: | pC0055-CMV-dPspCas13b-GS-ADAR2DD(E48 |
|---|
质粒简介
pC0055-CMV-dPspCas13b-GS-ADAR2DD(E488Q/T375G)-delta-984-1090哺乳基因编辑质粒
质粒图谱
pC0055-CMV-dPspCas13b-GS-ADAR2DD(E488Q/T375G)-delta-984-1090哺乳编辑质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pC0055-CMV-dPspCas13b-GS-ADAR2DD(E488Q/T375G)-delta-984-1090哺乳编辑质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验calculation for a dry tube of an 18mer with an O.D. of 1.00 is shown below (remembering that Joe is the dye-labeled primer for the A reaction, Fam is for C, Tamra is for G, and Rox is for T): 1.00 OD(37 ug/OD)(mol x mer/320 g)(10+12pmol/mol)(g/10+6ug
[5 ]变成:整理得:任一样品X0,q 除以参照品X0,cb 得:在这里△ C'T=CT,q-CT,cb 。△C’T与前面计算中用的△CT(用目标基因CT值减去参照基因CT值)相互区别。就象在1.1部分所描述的,如果条件优化较好,效率接近于1,内标相对于参照因子为:2.2. 2-△Cf方法的应用2-△CT'方法的一个应用就是确定实验处理对某一候选内标基因的影响。为了显示这一过程,我们做了血清饥饿/ 诱导实验(7) 。血清饥饿/ 诱导是研究某些 mRNA 降解的常用方法(8)。然而,血清可能影响一些基因
L ., Li, K. X., Yang, G. X. and He, G. Y. (2006) Low copy number p;enetransfer and stable expression in a commercial wheat cultivar via particle bombardment. J. E xp . Bol. 57,3737-37 4 6. 18. Y a o , Q . , C o n g ,L
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