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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
2UG/5UG
| 规格: | 2UG | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5UG | 产品价格: | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | NM_007289.2,CALLA; CD10; CMT2T; NEP |
|---|---|
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α等大肠杆菌 |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
质粒简介
pCR4-MME(NM_007289.2) 是一个人源cDNA基因克隆质粒。
质粒图谱
质粒序列
Homo sapiens membrane metallo-endopeptidase (MME), transcript variant 2b
基因编号: NM_007289.2
基因序列:
atg ggcaagtcag aaagtcagat ggatataact gatatcaaca ctccaaagcc
241 aaagaagaaa cagcgatgga ctccactgga gatcagcctc tcggtccttg tcctgctcct
301 caccatcata gctgtgacaa tgatcgcact ctatgcaacc tacgatgatg gtatttgcaa
361 gtcatcagac tgcataaaat cagctgctcg actgatccaa aacatggatg ccaccactga
421 gccttgtaca gactttttca aatatgcttg cggaggctgg ttgaaacgta atgtcattcc
481 cgagaccagc tcccgttacg gcaactttga cattttaaga gatgaactag aagtcgtttt
541 gaaagatgtc cttcaagaac ccaaaactga agatatagta gcagtgcaga aagcaaaagc
601 attgtacagg tcttgtataa atgaatctgc tattgatagc agaggtggag aacctctact
661 caaactgtta ccagacatat atgggtggcc agtagcaaca gaaaactggg agcaaaaata
721 tggtgcttct tggacagctg aaaaagctat tgcacaactg aattctaaat atgggaaaaa
781 agtccttatt aatttgtttg ttggcactga tgataagaat tctgtgaatc atgtaattca
841 tattgaccaa cctcgacttg gcctcccttc tagagattac tatgaatgca ctggaatcta
901 taaagaggct tgtacagcat atgtggattt tatgatttct gtggccagat tgattcgtca
961 ggaagaaaga ttgcccatcg atgaaaacca gcttgctttg gaaatgaata aagttatgga
1021 attggaaaaa gaaattgcca atgctacggc taaacctgaa gatcgaaatg atccaatgct
1081 tctgtataac aagatgacat tggcccagat ccaaaataac ttttcactag agatcaatgg
1141 gaagccattc agctggttga atttcacaaa tgaaatcatg tcaactgtga atattagtat
1201 tacaaatgag gaagatgtgg ttgtttatgc tccagaatat ttaaccaaac ttaagcccat
1261 tcttaccaaa tattctgcca gagatcttca aaatttaatg tcctggagat tcataatgga
1321 tcttgtaagc agcctcagcc gaacctacaa ggagtccaga aatgctttcc gcaaggccct
1381 ttatggtaca acctcagaaa cagcaacttg gagacgttgt gcaaactatg tcaatgggaa
1441 tatggaaaat gctgtgggga ggctttatgt ggaagcagca tttgctggag agagtaaaca
1501 tgtggtcgag gatttgattg cacagatccg agaagttttt attcagactt tagatgacct
1561 cacttggatg gatgccgaga caaaaaagag agctgaagaa aaggccttag caattaaaga
1621 aaggatcggc tatcctgatg acattgtttc aaatgataac aaactgaata atgagtacct
1681 cgagttgaac tacaaagaag atgaatactt cgagaacata attcaaaatt tgaaattcag
1741 ccaaagtaaa caactgaaga agctccgaga aaaggtggac aaagatgagt ggataagtgg
1801 agcagctgta gtcaatgcat tttactcttc aggaagaaat cagatagtct tcccagccgg
1861 cattctgcag ccccccttct ttagtgccca gcagtccaac tcattgaact atgggggcat
1921 cggcatggtc ataggacacg aaatcaccca tggcttcgat gacaatggca gaaactttaa
1981 caaagatgga gacctcgttg actggtggac tcaacagtct gcaagtaact ttaaggagca
2041 atcccagtgc atggtgtatc agtatggaaa cttttcctgg gacctggcag gtggacagca
2101 ccttaatgga attaatacac tgggagaaaa cattgctgat aatggaggtc ttggtcaagc
2161 atacagagcc tatcagaatt atattaaaaa gaatggcgaa gaaaaattac ttcctggact
2221 tgacctaaat cacaaacaac tatttttctt gaactttgca caggtgtggt gtggaaccta
2281 taggccagag tatgcggtta actccattaa aacagatgtg cacagtccag gcaatttcag
2341 gattattggg actttgcaga actctgcaga gttttcagaa gcctttcact gccgcaagaa
2401 ttcatacatg aatccagaaa agaagtgccg ggtttggtga
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文献和实验浓度不同,两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中,主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后,高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA,单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板(1ng/μL)(质粒 R-pGEX-4T-1,R 指代外源基因) 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2(5pmol/μL) 引物
的PCRMIX,是目前最“傻瓜”的 PCR 反应体系之一,不论是质粒、菌液、CDNA、基因组 DNA、或者是直接裂解的粗提物,GC 含量高达 75% 的模板,都能轻松扩增,不需要费力的“摸条件”! 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液,浓度为 2x。DNA 扩增时,只需加入模板,引物和水,使 MasterMix 溶液的浓度为 1× 即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行 PCR 扩增可以减少操作时间,避免因多步操作带来的污染,特别适宜高通量筛选基因的扩增
的成功取决于很多因素,其反应组分在扩增中起着至关重要的作用。以下总结了在 PCR 反应体系设置中需要考虑的一些重要因素。 【模板 DNA】 DNA 扩增的模板可以是多种来源,如基因组 DNA(gDNA)、互补 DNA(cDNA)和质粒 DNA。DNA 的组成和复杂程度决定了 PCR 扩增的最佳模板起始量。比如,在 50 μL 体系中 0.1-1 ng 质粒 DNA 已经完全足够,但同样体系需要 5-50 ng 的 gDNA。最佳模板起始量同时也取决于所用的 DNA 聚合酶类型,经过基因工程改造
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