- ¥800 - 1500
- 钦诚生物
- 上海
- QC0612
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
2UG/5UG
| 规格： | 2UG | 产品价格： | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5UG | 产品价格： | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | NM_001171628.1，MVCD1; VEGF; VPF |
|---|---|
| 质粒分类: | 基因文库质粒 |
| 原核抗性: | 壮观霉素Spe |
| 克隆菌株: | 大肠杆菌DH5α |
| 培养条件: | 37℃ |
质粒简介
pDONR223-VEGFA(NM_001171628.1) 是一个人源cDNA基因克隆质粒。Homo sapiens vascular endothelial growth factor A (VEGFA), transcript variant 6, mRNA
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3234 bp ds-DNA circular SYN 15-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3234
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 268..295
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 387..473
/gene="Escherichia coli rrnB"
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
primer_bind 537..553
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 570..668
/gene="mutant version of attL"
/label=attL1
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
CDS 669..1112
/codon_start=1
/label=VEGFA（NM_001171628.1）
/translation="MNFLLSWVHWSLALLLYLHHAKWSQAAPMAEGGGQNHHEVVKFMD
VYQRSYCHPIETLVDIFQEYPDEIEYIFKPSCVPLMRCGGCCNDEGLECVPTEESNITM
QIMRIKPHQGQHIGEMSFLQHNKCECRPKKDRARQEKCDKPRR"
protein_bind complement(1113..1211)
/gene="mutant version of attL"
/label=attL2
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
promoter complement(1230..1248)
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
primer_bind complement(1253..1269)
/label=M13 rev
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
CDS 1700..2491
/codon_start=1
/gene="aadA"
/product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy,
1985)"
/label=Spe
/note="confers resistance to spectinomycin and
streptomycin"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
rep_origin 2584..3172
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga
61 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
121 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
181 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaata cgcgtaccgc
241 tagccaggaa gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta
301 gtttgatgcc tggcagttta tggcgggcgt cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc
361 acaacgttca aatccgctcc cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa
421 caacagataa aacgaaaggc ccagtcttcc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg
481 gcagttccct actctcgcgt taacgctagc atggatgttt tcccagtcac gacgttgtaa
541 aacgacggcc agtcttaagc tcgggccccc aaataatgat tttattttga ctgatagtga
601 cctgttcgtt gcaacaaatt gatgagcaat gcttttttat aatgccaact ttgtacaaaa
661 aagttggcat gaactttctg ctgtcttggg tgcattggag ccttgccttg ctgctctacc
721 tccaccatgc caagtggtcc caggctgcac ccatggcaga aggaggaggg cagaatcatc
781 acgaagtggt gaagttcatg gatgtctatc agcgcagcta ctgccatcca atcgagaccc
841 tggtggacat cttccaggag taccctgatg agatcgagta catcttcaag ccatcctgtg
901 tgcccctgat gcgatgcggg ggctgctgca atgacgaggg cctggagtgt gtgcccactg
961 aggagtccaa catcaccatg cagattatgc ggatcaaacc tcaccaaggc cagcacatag
1021 gagagatgag cttcctacag cacaacaaat gtgaatgcag accaaagaaa gatagagcaa
1081 gacaagaaaa atgtgacaag ccgaggcggt gacccaactt tcttgtacaa agttggcatt
1141 ataagaaagc attgcttatc aatttgttgc aacgaacagg tcactatcag tcaaaataaa
1201 atcattattt ggccatccag ctgatatccc ctatagtgag tcgtattaca tggtcatagc
1261 tgtttcctgg cagctctggc ccgtgtctca aaatctctga tgttacattg cacaagataa
1321 aaatatatca tcatgcctcc tctagaccag ccaggacaga aatgcctcga cttcgctgct
1381 gcccaaggtt gccgggtgac gcacaccgtg gaaacggatg aaggcacgaa cccagtggac
1441 ataagcctgt tcggttcgta agctgtaatg caagtagcgt atgcgctcac gcaactggtc
1501 cagaaccttg accgaacgca gcggtggtaa cggcgcagtg gcggttttca tggcttgtta
1561 tgactgtttt tttggggtac agtctatgcc tcgggcatcc aagcagcaag cgcgttacgc
1621 cgtgggtcga tgtttgatgt tatggagcag caacgatgtt acgcagcagg gcagtcgccc
1681 taaaacaaag ttaaacatca tgagggaagc ggtgatcgcc gaagtatcga ctcaactatc
1741 agaggtagtt ggcgtcatcg agcgccatct cgaaccgacg ttgctggccg tacatttgta
1801 cggctccgca gtggatggcg gcctgaagcc acacagtgat attgatttgc tggttacggt
1861 gaccgtaagg cttgatgaaa caacgcggcg agctttgatc aacgaccttt tggaaacttc
1921 ggcttcccct ggagagagcg agattctccg cgctgtagaa gtcaccattg ttgtgcacga
1981 cgacatcatt ccgtggcgtt atccagctaa gcgcgaactg caatttggag aatggcagcg
2041 caatgacatt cttgcaggta tcttcgagcc agccacgatc gacattgatc tggctatctt
2101 gctgacaaaa gcaagagaac atagcgttgc cttggtaggt ccagcggcgg aggaactctt
2161 tgatccggtt cctgaacagg atctatttga ggcgctaaat gaaaccttaa cgctatggaa
2221 ctcgccgccc gactgggctg gcgatgagcg aaatgtagtg cttacgttgt cccgcatttg
2281 gtacagcgca gtaaccggca aaatcgcgcc gaaggatgtc gctgccgact gggcaatgga
2341 gcgcctgccg gcccagtatc agcccgtcat acttgaagct agacaggctt atcttggaca
2401 agaagaagat cgcttggcct cgcgcgcaga tcagttggaa gaatttgtcc actacgtgaa
2461 aggcgagatc accaaggtag tcggcaaata accctcgagc cacccatgac caaaatccct
2521 taacgtgagt tacgcgtcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc
2581 ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa aaccaccgct
2641 accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact ctttttccga aggtaactgg
2701 cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt ccttctagtg tagccgtagt taggccacca
2761 cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt taccagtggc
2821 tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat agttaccgga
2881 taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac
2941 gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagcattga gaaagcgcca cgcttcccga
3001 agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag
3061 ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg
3121 acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag
3181 caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgtt
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文献和实验相关实验
浓度不同，两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中，主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后，高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA，单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板（1ng/μL）（质粒 R-pGEX-4T-1，R 指代外源基因） 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2（5pmol/μL） 引物
的上下游两端的序列连接起来，从而实现了目的基因的敲除。再如，可为细胞提供一个修复的模板质粒，这样细胞就可按照提供的模板在修复过程中引入片段插入或定点突变。也可对受精卵细胞进行基因编辑，并将其导入代孕母体中，可实现基因编辑动物模型的构建。
，近年来人们较多采用此方法克隆基因启动子。苏宁等根据已报道的水稻叶绿体16SrRNA启动子基因序列设计5'启动子序列的引物，以水稻叶绿体DNA为模板，PCR扩增出16SrRNA基因5'启动子区的片段，酶切克隆到pSK的SacI和SphI位点，构建测序载体质粒pZ16S，进行序列测定，结果表明所克隆的片段长为144bp，含有SD序列。同源比较结果表明，所克隆的片段与水稻叶绿体16SrRNA启动子序列具有100％的同源性。上述的PCR方法简便、快捷、操作简单，是人们较为广泛使用的技术。1.3 环状PCR
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pENTR223-VEGFA人源基因模板质粒
¥800 - 1500
