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HB2151大肠克隆菌

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  • ¥1000
  • 钦诚生物
  • 上海
  • QC1469
  • 2025年07月11日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      负20度

    • 保质期

      2年

    • 供应商

      钦诚生物

    • 规格

      5ug

    菌株名称:E. coli HB2151 Cells
    规格:5ug/管
    状态:20%甘油保存
    性质参数:K12 (lac-pro), ara, nalr, thi/F'[proAB, lacIq, lacZ M15].
    建议:
    1. 菌株保存在20%甘油的培养基中,接到菌株后,请挑取菌液在2x YT-N平板(2xYT medium containing 100 μg/ml nalidixic acid)上划线,37℃过夜培养后,再次挑取单个菌落在Minimal Medium 平板上划线,37℃过夜培养后即可使用,以便使纤毛充分表达,利于噬菌体感染;
    2. 在Minimal Medium 平板上生长的细菌,不宜在冰箱中放置过久再使用;
    3. Minimal Medium plate 配制方法:
    Prepare stocks of the following:
           1 M MgCl2•6H2O: Dissolve 20.33 g in distilled water to a final volume of 100 ml and autoclave.
           1 M CaCl2•2H2O: Dissolve 14.7 g in distilled water to a final volume of 100 ml and autoclave.
           1 M thiamine hydrochloride: Dissolve 33.73 g in distilled water to a final volume of 100 ml and sterilize using a 0.22 μm filter.
           20% glucose: Dissolve 20 g of D-(+)-glucose (anhydrous) in distilled water to a final volume of 100 ml and sterilize by filtration through a 0.2 μm filter. Do not autoclave.
           In a 500 ml bottle, dissolve 6 g of Na2HPO4 (dibasic), 3 g of KH2PO4(monobasic) and 1 g of NH4Cl in distilled water to a final volume of 500 ml. adjust the pH to 7.4 with NaOH.
           In a separate 1 liter bottle, add distilled water to 15 g of Bacto-agar to a final Volume of 500 ml. Autoclave both bottles simultaneously to sterilize. Cool both bottles to 50-60°C and combine.  Add1 ml of 1 M MgCl2•6H2O, 1 ml of 1 M CaCl2•2H2O, 1 ml of 1 M thiamine hydrochloride and 5 ml of 20% glucose. Pour plates immediately. 

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 经验优化与高级技巧篇

      短片段(5kb 以内)的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率,可以从以下几方面考虑: ①选择合适的克隆载体,例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体; ②选择合适的克隆方法,通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高; ③选择合适的纯化方式,纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用,并且注意两者的使用比例; ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞,例如 stbl3,JM109 等; ⑤挑选单克隆菌落时需要注意,成功重组大片段的阳性单克隆菌

    • 标准菌株验证鉴定步骤

      。 过氧化氢酶试验:滴加3% 过氧化氢试液,若菌落表面有气泡产生,为过氧化氢酶试验阳性,否则为阴性。本菌为阴性反应。   3、需购买试剂: 菌株 培养基及试剂 金黄色葡萄球菌 HB8278革兰氏染色液试剂盒、HB4117 兔血浆、HB0109-7营养琼脂培养基 大肠埃希氏菌 HBIG13  HBI大肠杆菌生化鉴定条、HB8280

    • 图说基因点突变

      。从大肠杆菌里提取原始质粒模板一般都被甲基化的,DpnI 可以将原始野生型质粒模板进行酶切, 而质粒扩增的突变型质粒不能被酶切从而保留下来。4. 最后,将酶切后产物转化入大肠杆菌,通过涂板挑取单克隆菌落后,摇菌测序,这样就可以得到突变基因的质粒啦。

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