- ¥800 - 1500
- 钦诚生物
- 上海
- QC0526
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
2UG/5UG
| 规格： | 2UG | 产品价格： | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5UG | 产品价格： | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | BC022777.1，acylglycerol kinase |
|---|---|
| 质粒分类: | 基因文库质粒 |
| 原核抗性: | 壮观霉素Spe |
| 克隆菌株: | 大肠杆菌DH5α |
| 培养条件: | 37℃ |
质粒简介
pDONR223-AGK是一个人源cDNA基因克隆质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4058 bp ds-DNA circular SYN 14-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4058
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 268..295
/note="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 387..473
/gene="Escherichia coli rrnB"
/note="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
misc_feature 537..553
/note="M13F"
protein_bind 570..668
/gene="mutant version of attL"
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="attL1"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
misc_feature 669..1936
/note="AGK"
protein_bind complement(1937..2035)
/gene="mutant version of attL"
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="attL2"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
misc_feature complement(2077..2093)
/note="M13R"
CDS 2524..3315
/codon_start=1
/gene="aadA"
/product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy,
1985)"
/note="Spe"
/note="confers resistance to spectinomycin and
streptomycin"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
rep_origin 3408..3996
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga
61 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
121 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
181 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaata cgcgtaccgc
241 tagccaggaa gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta
301 gtttgatgcc tggcagttta tggcgggcgt cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc
361 acaacgttca aatccgctcc cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa
421 caacagataa aacgaaaggc ccagtcttcc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg
481 gcagttccct actctcgcgt taacgctagc atggatgttt tcccagtcac gacgttgtaa
541 aacgacggcc agtcttaagc tcgggccccc aaataatgat tttattttga ctgatagtga
601 cctgttcgtt gcaacaaatt gatgagcaat gcttttttat aatgccaact ttgtacaaaa
661 aagttggcat gacggtgttc tttaaaacgc ttcgaaatca ctggaagaaa actacagctg
721 ggctctgcct gctgacctgg ggaggccatt ggctctatgg aaaacactgt gataacctcc
781 taaggagagc agcctgtcaa gaagctcagg tgtttggcaa tcaactcatt cctcccaatg
841 cacaagtgaa gaaggccact gtttttctca atcctgcagc ttgcaaagga aaagctagga
901 ctctatttga aaaaaatgct gccccgattt tacatttatc tggcatggat gtgactattg
961 ttaagacaga ttatgaggga caagccaaga aactcctgga actgatggaa aacacggatg
1021 tgatcattgt tgcaggagga gatgggacac tgcaggaggt tgttactggt gttcttcgac
1081 gaacagatga ggctaccttc agtaagattc ccattggatt tatcccactg ggagagacca
1141 gtagtttgag tcataccctc tttgccgaaa gtggaaacaa agtccaacat attactgatg
1201 ccacacttgc cattgtgaaa ggagagacag ttccacttga tgtcttgcag atcaagggtg
1261 aaaaggaaca gcctgtattt gcaatgaccg gccttcgatg gggatctttc agagatgctg
1321 gcgtcaaagt tagcaagtac tggtatcttg ggcctctaaa aatcaaagca gcccactttt
1381 tcagcactct taaggagtgg cctcagactc atcaagcctc tatctcatac acgggaccta
1441 cagagagacc tcccaatgaa ccagaggaga cccctgtaca aaggccttct ttgtacagga
1501 gaatattacg aaggcttgcg tcctactggg cacaaccaca ggatgccctt tcccaagagg
1561 tgagcccgga ggtctggaaa gatgtgcagc tgtccaccat tgaactgtcc atcacaacac
1621 ggaataatca gcttgacccg acaagcaaag aagattttct gaatatctgc attgaacctg
1681 acaccatcag caaaggagac tttataacta taggaagtcg aaaggtgaga aaccccaagc
1741 tgcacgtgga gggcacggag tgtctccaag ccagccagtg cactttgctt atcccggagg
1801 gagcaggggg ctcttttagc attgacagtg aggagtatga agcgatgcct gtggaggtga
1861 aactgctccc caggaagctg cagttcttct gtgatcctag gaagagagaa cagatgctca
1921 caagccccac ccagtgccca actttcttgt acaaagttgg cattataaga aagcattgct
1981 tatcaatttg ttgcaacgaa caggtcacta tcagtcaaaa taaaatcatt atttggccat
2041 ccagctgata tcccctatag tgagtcgtat tacatggtca tagctgtttc ctggcagctc
2101 tggcccgtgt ctcaaaatct ctgatgttac attgcacaag ataaaaatat atcatcatgc
2161 ctcctctaga ccagccagga cagaaatgcc tcgacttcgc tgctgcccaa ggttgccggg
2221 tgacgcacac cgtggaaacg gatgaaggca cgaacccagt ggacataagc ctgttcggtt
2281 cgtaagctgt aatgcaagta gcgtatgcgc tcacgcaact ggtccagaac cttgaccgaa
2341 cgcagcggtg gtaacggcgc agtggcggtt ttcatggctt gttatgactg tttttttggg
2401 gtacagtcta tgcctcgggc atccaagcag caagcgcgtt acgccgtggg tcgatgtttg
2461 atgttatgga gcagcaacga tgttacgcag cagggcagtc gccctaaaac aaagttaaac
2521 atcatgaggg aagcggtgat cgccgaagta tcgactcaac tatcagaggt agttggcgtc
2581 atcgagcgcc atctcgaacc gacgttgctg gccgtacatt tgtacggctc cgcagtggat
2641 ggcggcctga agccacacag tgatattgat ttgctggtta cggtgaccgt aaggcttgat
2701 gaaacaacgc ggcgagcttt gatcaacgac cttttggaaa cttcggcttc ccctggagag
2761 agcgagattc tccgcgctgt agaagtcacc attgttgtgc acgacgacat cattccgtgg
2821 cgttatccag ctaagcgcga actgcaattt ggagaatggc agcgcaatga cattcttgca
2881 ggtatcttcg agccagccac gatcgacatt gatctggcta tcttgctgac aaaagcaaga
2941 gaacatagcg ttgccttggt aggtccagcg gcggaggaac tctttgatcc ggttcctgaa
3001 caggatctat ttgaggcgct aaatgaaacc ttaacgctat ggaactcgcc gcccgactgg
3061 gctggcgatg agcgaaatgt agtgcttacg ttgtcccgca tttggtacag cgcagtaacc
3121 ggcaaaatcg cgccgaagga tgtcgctgcc gactgggcaa tggagcgcct gccggcccag
3181 tatcagcccg tcatacttga agctagacag gcttatcttg gacaagaaga agatcgcttg
3241 gcctcgcgcg cagatcagtt ggaagaattt gtccactacg tgaaaggcga gatcaccaag
3301 gtagtcggca aataaccctc gagccaccca tgaccaaaat cccttaacgt gagttacgcg
3361 tcgttccact gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag gatcttcttg agatcctttt
3421 tttctgcgcg taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac cgctaccagc ggtggtttgt
3481 ttgccggatc aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa ctggcttcag cagagcgcag
3541 ataccaaata ctgtccttct agtgtagccg tagttaggcc accacttcaa gaactctgta
3601 gcaccgccta catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag tggctgctgc cagtggcgat
3661 aagtcgtgtc ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac cggataaggc gcagcggtcg
3721 ggctgaacgg ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc gaacgaccta caccgaactg
3781 agatacctac agcgtgagca ttgagaaagc gccacgcttc ccgaagggag aaaggcggac
3841 aggtatccgg taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca cgagggagct tccaggggga
3901 aacgcctggt atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc tctgacttga gcgtcgattt
3961 ttgtgatgct cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg ccagcaacgc ggccttttta
4021 cggttcctgg ccttttgctg gccttttgct cacatgtt
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文献和实验相关实验
浓度不同，两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中，主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后，高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA，单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板（1ng/μL）（质粒 R-pGEX-4T-1，R 指代外源基因） 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2（5pmol/μL） 引物
对照的siRNA应该和选中的siRNA序列有相同的组成,但是和mRNA没有明显的同源性.通常的做法是将选中的siRNA中的碱基序列打乱.当然,同样要保证它和其他基因没有同源性.3、RNAi表达载体的选用化学合成与体外转录方法都是在体外得到siRNA后再导入细胞内,但是这两种方法主要有两方面无法克服的缺点：siRNA进入细胞后容易被降解；进入细胞siRNA在细胞内的 RNAi效应持续时间短.针对这种情况,出现了质粒、病毒类载体介导的siRNA体内表达.该方法的基本思路是：将siRNA对应的DNA双链模板
的上下游两端的序列连接起来，从而实现了目的基因的敲除。再如，可为细胞提供一个修复的模板质粒，这样细胞就可按照提供的模板在修复过程中引入片段插入或定点突变。也可对受精卵细胞进行基因编辑，并将其导入代孕母体中，可实现基因编辑动物模型的构建。
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pENTR223-AGK人源基因模板质粒
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