海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)

特别提示：包括海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)
英文名称：Extraction kit for genomic DNA from marine animals tissue
产品货号：WH0021
产品规格：50次|200次

本试剂盒是特别针对海洋动物的基因组提取试剂盒，已成功提取到鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物组织基因组DNA。无需酚/lǜ仿抽提，使用安全快捷方便，可zuì大限度去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

产品特点：
·专用性强：专为针对海洋动物开发出来的专项产品。
·操作时间短：1-2h左右即可获得高质量的海洋动物基因组DNA。
·无毒害：无需使用酚lǜ仿等有害试剂，操作安全。
·纯度高：可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。

提取得率：

材料	建议孵育时间	DNA得量
贝类组织	0.5 h	12-20μg
虾组织	1 h	8-14 μg
鱼类组织	1 h	15-40 μg

提取实例：

虾夷扇贝基因组提取，起始量：腮20mg，其余30mg，100μl洗脱，3μl上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min。Marker：λDNA/Hind III


鲫鱼基因组DNA提取，起始量：腮20mg，肌肉30mg，100μl洗脱，3μl上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min；Marker：λDNA/Hind III



试剂盒组成：

组分	50T	200T
缓冲液GA	15ml	50ml
缓冲液GB	15ml	50ml
缓冲液GD	13ml	52ml
漂洗液PW	15ml	50ml
洗脱缓冲液TE	15ml	60ml
Proteinase K	1ml	4×1ml
吸附柱CB3	50个	200个
收集管（2ml）	50个	200个

保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。

选配组分：RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
3．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。

使用方法：
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1．切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μl GA缓冲液的离心管中，涡旋振荡15sec。
  注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20 mg。
  如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A（100 mg/ml）溶液（客户自备，目录号：WH0217），振荡15 sec，室温放置5 min。
2．加入20 μl Proteinase K （20 mg/ml)溶液，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
  注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2h即可完成。扇贝组织0.5 h基本可裂解完全，虾和鱼类组织1 h。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15 sec。
3．加入200μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
  注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4．加人200μl无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。
6．向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7．向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8．重复操作步骤7。
9．将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm（~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min，将溶液收集到离心管中。
  注意：洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g )离心2 min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

除了海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法),，我公司还供应以下相关产品：
 

货号	名称	规格
WE0164	高纯质粒大提试剂盒	10次
WE0170	DNA产物快速纯化试剂盒	50次|200次
WE0187	土壤基因组提取试剂盒	50次
WE0399	游离DNA样本保存管(10ml，PET)	5ml×5支|5ml×50支
ALH106	PAGE胶DNA纯化回收试剂盒	50次
SY0005	核糖核酸酶A(10mg/ml)	1ml
QN0902	革兰氏阳性菌质粒小量提取试剂盒	50T|100T
ML020	法医样本核酸提取试剂盒(磁珠法)	64T
MT0049	微量基因组DNA提取试剂盒(唾液/毛发)	50T
GL1243	P:C(25:24,pH﹥7.8)	100ml
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WH0157	高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒	4×96孔|24×96孔板