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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10000
- 英文名:
RNA
- 保质期:
2-8℃,避光,有效期1年
- 供应商:
上海羽哚生物
- 保存条件:
2-8℃,避光,有效期1年
- 规格:
50T/100T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥900.0 |
| 别名 | 总RNA提取试剂盒 |
|---|---|
| 英文名称 | Total RNA Extraction Kit |
| 储存条件 | 2-8℃,避光,有效期1年 |
| 单位 | 盒 |
| 规格 | 50T 100T |
产品内容:
| 上海羽哚生物 总RNA提取试剂盒 试剂盒组成 |
R1200-50 | R1200-100 | 保存 | 有效期 |
| 裂解液 | 50ml | 100ml | 2-8℃ | 一年 |
| 漂洗液 | 15ml | 30ml | RT | 一年 |
| 洗柱液 | 50ml | 100ml | RT | 一年 |
| RNase free ddH2O | 15ml | 30ml | RT | 一年 |
| RNase free吸附柱 | 50个 | 100个 | RT | 一年 |
| RNase free收集管(2ml) | 50个 | 100个 | RT | 一年 |
上海羽哚生物
总RNA提取试剂盒
1. 样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。
2. 将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
4. 2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。
6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2-8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。
9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。
上海羽哚生物
总RNA提取试剂盒
注意事项:
1,所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。
上海羽哚生物
总RNA提取试剂盒提醒您注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
上海羽哚生物
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验国产 10ml 120 免疫学 弗氏不完全佐剂 Sigma F5506 10ml 170 弗氏完全佐剂 Sigma F5881 10ml 180 NO-KIT 国产 100T 480 NOS-KIT 国产 50T 380 耗材 针头式滤器 Pall 25mm 0.2u 8/个 0.5ml离心管 Axygen 1000支/包 0.17/个 200ul吸头 Axygen 1000支/包 0.10
要勤换。 6. 设置RNA操作专用实验室,所有器械等应为专用。 动植物总RNA提取-Trizol法 Trizol法适用于人类. 动物. 植物. 微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克。用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染。 RNA可直接用于Northern斑点分析,斑点杂交, Poly(A)+分离,体外翻译,RNase封阻分析和分子克隆。 在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80
,如:1)异硫氰酸胍-苯酚法,许多公司有现成的总RNA提取 试剂盒(如Trizol试剂盒,其实质也是异硫氰酸胍-苯酚法),从而可快速有效地提取到高质量的总RNA。2)超离心方法,可以获得丰富且质量高的RNA。缺点是实验时间比较长,要求离心过夜。3)其它一些试剂盒,主要是利用某些特定的介质吸附RNA,驱除其它杂质以后,将纯净的RNA洗脱下来,这样就可以在短时间内获得纯净的RNA。但是价格比较昂贵。 目前,最常用的RNA纯化方法是使用异硫氰酸胍/酸性酚的一步法。异硫氰酸胍-苯酚法的基本过程是:先将样品











