石蜡包埋组织microRNA提取试剂盒哪里卖

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名称：石蜡包埋组织microRNA提取试剂盒
编号：ALH074
规格：50次
产地：国产|进口
本试剂盒用于快速从福尔马林固定、石蜡包埋组织样品中提取RNA包括microRNA。独特的裂解液/蛋白酶K迅速裂解细胞释放出RNA，然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。得到的RNA可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。

产品组分：
裂解液——————15ml
结合液——————25 ml
漂洗液——————10ml
蛋白酶K——————20mg（可选）
RNase-free H2O——————10ml
基因组DNA清除柱和收集管——————50套
RNA吸附柱和收集管室温——————50套

产品特点：
1.完全不使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品RNA提取操作一般可在1小时内完成。
3.试剂盒的独特基因组清除柱和配方确保有效清除基因组DNA残留，一般情况下得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保RNA高纯度，可直接用于下游各种实验。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组DNA清除柱和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如不超过2个10μm厚度石蜡切片。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液PKD、结合液RBC中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA提取过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）
5. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（DNase 消化也无法做到100%无残留），本试剂盒采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术，绝大多数DNA 已经被清除，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
6. RNA 纯度及浓度检测：
完整性： RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于石蜡包埋组织福尔马林固定和包埋过程中一般由于RNA 与蛋白反应交联会导致RNA 断裂或者降解，一般电泳后UV下只能看到模糊弥散（smear）带型，随着储存的时间越长，降解断裂越严重，甚至只能看到峰值仅仅在100bp 左右的模糊条带。这都属于RNA 提取正常情况。
纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的参考指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA不纯。
浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40。

储存条件：室温，有效期9个月。

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编号	名称
ALH048	病毒基因组快速提取试剂盒
ALH177	唾液DNA收集和保存管
ALH156	酵母基因组DNA大量提取试剂盒
ALH022	微量样品RNA提取试剂盒
ALH105	寡核苷酸纯化回收试剂盒
ALH157	细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒
ALH262	第一链cDNA高效合成试剂盒
ALH223	Pfu DNA聚合酶
ALH031	RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)
ALH233	长片段Taq DNA聚合酶
ALH128	大量组织细胞DNA提取试剂盒
ALH185	SYBR Green qPCR预混液
ALH091	大型质粒大量提取试剂盒(＞10kb质粒)
ALH257	M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性)
ALH338	无缝连接克隆试剂盒
ALH266	反转录试剂盒
ALH025	细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒
ALH130	动植物基因组DNA快速提取试剂盒
ALH154	酵母DNA提取试剂盒
ALH328	Gateway entry clone构建试剂盒
ALH005	超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
ALH057	RNA酶灭活剂
ALH027	细菌RNA提取试剂盒
ALH011	超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
ALH107	凝血DNA提取试剂盒
ALH424	强效EB去除剂
ALH175	固定包埋组织DNA提取试剂盒
ALH178	唾液DNA收集提取试剂盒
ALH378	PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色)
ALH042	骨RNA提取试剂盒
ALH352	DNA加A尾试剂盒
ALH430	DNA转染试剂
ALH602	基因组DNA去污剂
ALH282	PCR增强剂
ALH616	重组人KGF-2
ALH172	病毒DNA提取试剂盒
ALH180	尿液DNA提取试剂盒
ALH139	大量细菌基因组DNA提取试剂盒
ALH036	植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)
ALH207	植物直接PCR试剂盒(无需提取DNA)