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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 库存:
20-60
- 供应商:
上海邦景
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
Rabbit Anti-Avidin/PE-Cy3
- 规格:
0.1ml
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文献和实验FITC标记的B抗体染色,根据两种抗体的动物种属不同,可用直接法也可用间接法,结果A抗原呈现橘红色荧光,而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中,常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如,在实验设计时,选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗,相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时,由于两种一抗种属来源不同,可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗,滴加二抗时,先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育,洗涤后,滴加SABC-Cy3
经上述过程制备的生物素化的MHC/抗原肽复合物为单体分子,通过加入链酶亲和素,一个链酶亲和素分子有4个生物素结合位点,即可以结合4个生物素化的MHC单体分子,形成MHC四聚体。 【试剂及材料】 (1)荧光标记的链霉亲和素(通常用PE标记) (2)经上述过程制备的生物素化的MHC单体 (3)加样器及吸头等 【操作步骤】 (1)计算样品中生物素化的MHC单体的摩尔数。建议生物素化的MHC单体浓度为2mg/ml,样品体积为100μl (2)计算链霉亲和素中生物素结合
MHC I STREPTAMERS® 检测与分离抗原特异性 (CD8+ T) 细胞
通过 TCR 与 MHC 多肽复合物间的特异性识别作用,可以对抗原特异性 T 细胞进行检测和分离。然而,当 MHC 多肽复合物为单体状态时,其与 T 细胞的结合并不稳定。若将其四聚体化后,其与 TCR 的结合可保持在一个稳定的状态,成为检测的工具。德国 IBA Lifesciences 研发的 MHC I STREPTAMERS® 技术,利用了这一特点,将传统的链霉亲和素改进为 Strep -Tactin®,搭配荧光标记或纳米磁珠,与多聚化的低亲和力MHC I-Streps 形成复合
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