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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
170
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
25g|50g
特别提示:包括封闭用脱脂奶粉在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:封闭用脱脂奶粉
产品货号:GL1543
产品规格:25g|50g
用途:
Western Blot免疫印迹中封闭抗体
注意事项:
高纯度脱脂奶粉
储存条件:室温,24个月
除了封闭用脱脂奶粉,,我公司还供应以下相关产品:
名称:TMB显色液(ELISA HRP显色用)
货号:YT076
规格:100ml
本试剂盒是一种采用了zuì新单一溶液TMB显色技术,通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色,用于ELISA等的显色液。本显色液也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。
通常的TMB显色试剂由多个组份组成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不太方便,并且也容易导致检测结果不太稳定。本TMB显色液采用了zuì新的TMB显色技术,把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中,仅由单一溶液组成,简化了操作步骤,并且使检测结果更加稳定可靠。
TMB,即3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下,TMB会产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。
辣根过氧化物酶催化TMB显蓝色后可以使用2M H2SO4终止反应。加入硫酸后,溶液呈黄色,此时可以在450nm测定吸光度。
本试剂盒zuì常用于ELISA检测,也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。用于ELISA检测时,每个样品通常使用0.2毫升显色液,一个包装的本产品共可以检测约500个样品。
储存条件:4℃,有效期一年。
名称:EDTA抗原修复液(50×)
货号:SY0764
规格:100ml
免疫染色实验,细胞或组织往往需要经多聚jiǎ醛、jiǎ醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构,然而此步操作通常会封闭抗原决定簇,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,从而引起染色信号衰减,甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于:1)醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,从而封闭抗原表位;2)醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联(cross-link),形成醛交联蛋白,导致抗原表位被封闭。因此,需要对固定组织进行抗原修复(antigen retrieval,AR)来逆转被掩盖的抗原表位,使其重新暴露出来,恢复抗原表位-抗体的结合能力,从而改善染色效果。
抗原修复的方法非常多,主要有热诱导的抗原修复(Heat Induced Epitope Retrieval,HIER)和酶诱导的抗原修复(Proteolytic Induced Epitope Retrieval),修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步,抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液,从而达到zuì佳的修复效果。
本品为EDTA抗原修复缓冲液,pH8.0,是一款非常经典且应用广泛的热修复缓冲液之一,适用于大多数的抗原,经此缓冲液修复后的染色信号明显得以增强。本品特别适合用于石蜡切片,也可用于冰冻切片等其他样本。本品为50×浓缩的EDTA抗原修复液,使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。按照每个片子需10ml抗原修复液的量来计算,约可做500个样品。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片,而冰冻切片由于组织比较脆弱,易在修复过程中被破坏掉,因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位,导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复,也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下,可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3)修复过程中一定要使用足量的修复液(1×)来完全浸没组织切片。
4)不同pH的修复液对修复效果的影响很明显,归于传统习惯使用柠檬酸钠修复液,pH6.0(SY0763)比较多。目前很多资料表明绝大多数抗原(抗体),使用高pH值(约8.0或9.0)的修复液能得到更好的染色效果。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验相关专题 生物实验中的封闭剂 Q:western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么? A:脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原 的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。 Q:请问封闭液和抗体稀释液用BSA 和脱脂奶粉有什么区别呢? 有人跟我说奶粉的封闭效果更好些,但是通常只能用于WesterBlot,如果要做ELISA或者phage display
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liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达,分子量是14kd,5%的浓缩胶70v,12%,或15%的分离胶110v,跑90min。湿转:100v,90min。封闭用5%的脱脂奶粉,封闭3h(因为背景深,以为封闭久会好些)。一抗1:3000,4度过夜,二抗1:5000,孵育1h,洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深,虽然可以看见目的条带,但还是有一些非特异性的条带出现,不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。
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