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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 英文名：
昆虫细胞裂解液
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50mL
1）昆虫细胞裂解液50mL规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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储存事项:
A. 昆虫细胞裂解液50mL规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 昆虫细胞裂解液50mL规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) 昆虫细胞裂解液50mL规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验细胞表达系统的主要优点是蛋白翻译加工后机制接近体内的天然形式，容易保留生物活性，缺点是很难高通量表达，且建立稳定细胞系的技术难度大，操作繁琐，生产成本高。 无细胞表达系统 和传统的体内表达不同，无细胞表达系统是以细胞裂解液为基础，在试管中进行的蛋白表达。无细胞蛋白表达系统是一个开放系统，不需要依赖活细胞。使用从不同物种的细胞（例如，大肠杆菌、小麦胚芽、塔氏利什曼原虫、兔网织红细胞、昆虫或人类细胞）中提取的生物分子翻译机制，在溶液中对重组蛋白质进行生产的过程。 开放性系统赋予蛋白表达的灵活性，无细胞
。 标本盒 用来保存针插干燥标本。标本盒用木材或硬纸板制成。为了便于存放，标本盒大小有一定规定，其规格为长38.1厘米、宽44.4厘米，高7.5厘米，盒盖上装有玻璃，便于隔盖观察盒内标本。为防止虫害或菌类侵入，盒盖和盒体之间要有凹凸槽口相接，使其尽量密合。盒底铺有软木板，便于插下昆虫针。 标本柜 是保存干燥标本的专用柜。其规格应为双层
蛋白印迹(Western Blot) 常用试剂 >>>蛋白抽提 货号 品名 规格 价格 备注 WB003 组织蛋白抽提试剂
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