克必隆常态转化液20 次规格

实验步骤：
(1) 克必隆常态转化液20 次规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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储存事项:
A. 克必隆常态转化液20 次规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 克必隆常态转化液20 次规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Superoxide dismutase( 抗氧化酶 )2mg  96 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 离心法 )1次
TLR4 激活剂2mL  6nt 随机引物，0.5μg/μL5μg
Tocopherol( 抗氧化剂 )2g  6nt 随机引物 ( 抗水解 )，0.5mM100μL
Trequinsin(PDE III 抑制剂 )2mg  5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL
Trichostatin A(HDAC 抑制剂 )100μg  5-FITC1g
15mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个  硫酸新霉素干粉1g
15mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个  硫酸庆大霉素溶液 ,15mg/mL2mL
15mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个  硫酸葡聚糖1g
15mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个  硫酸链霉素溶液 ,50mg/mL10mL
柱式 DNA 胶回收试剂盒50 次  硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
膦酰二肽溶液，10mg/mL10mL  NBD-Cl25mg
PMSF 溶液，10mg/mL5mL  NAO 25mg
CHAPS5g  NAC( 抗氧化剂 )2g
辛甲基 β 葡糖苷1g  n- 十二烷基 -β-D- 麦芽糖苷1g
辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)5g  mRNA 提取试剂盒25 次
侧孢短芽孢杆菌   海洋盐单胞菌
奇异变形杆菌ATCC35659冻干粉   胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm/25cm2
粉褶侧耳、粉红侧耳   荚膜红细菌
单增李斯特菌   土壤伯克氏菌
罗斯酵母   金黄色葡萄球菌 ATCC 6538P
反曲毛壳   婴儿双歧杆菌  乳制品发酵；食品饮料；模式菌株．厌氧
河流弧菌   普通变形杆菌
玫瑰红表面培养基60mm/25cm2   光滑念珠菌KTCC0001冻干粉
蜡蚧轮枝孢菌   香蕉炭疽盘长孢菌
克必隆常态转化液20 次规格花生根瘤菌   白色念珠菌AS2.2086冻干粉
干酪乳杆菌   荧光威克酵母
大肠埃希菌ATCC35218冻干粉   登佐链霉菌
鸡纵   Herbaspirillumcanariense  模式菌株
阴沟肠杆菌   Herbaspirillumaurantiacum  模式菌株
服务流程：
1）克必隆常态转化液20 次规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日