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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
21
- 英文名：
克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20 次
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）20 次费用详细介绍：
操作步骤:
1. 克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）20 次费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）20 次费用的相关产品：
Sodium Butyrate(HDAC 抑制剂 )1g 96 孔板病毒 DNAout( 真空法 )1次
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制剂 )2g 96 孔板病毒 DNAout( 离心法 )5次
SP600125(JNK 抑制剂 )5mg 96 孔板病毒 DNAout( 离心法 )1次
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制剂 )1g 96 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 真空法 )1次
Staurosporine(PKC 抑制剂 )
高载量 PCR 片段纯化试剂盒100 次 咪唑溶液，2M100mL
海量 PCR 片段纯化试剂盒5次 咪唑25g
96 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 离心法 )1次 脉冲电泳 Marker(Lambda LadderPFG)50 次
96 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 离心法 )5次 脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次
96 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 真空法 )1次 脉冲电泳 Marker( 低范围 PFG)50 次
硫酸庆大霉素溶液 ,15mg/mL2mL T3 体外转录试剂盒50 次
硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL T1 感受态细胞10×100μL
硫酸卡那霉素干粉1g SYBR Green II 核酸染料100 μL
C 溶液 ,5mg/mL10mL SURE 化学感受态细胞0.1mL×10
硫酸新霉素干粉1g Superoxide dismutase( 抗氧化酶 )2mg
苍白芽孢杆菌 细黄链霉菌
白色念珠菌冻干粉 肺炎克雷伯菌冻干粉
铜绿假单胞菌 费氏志贺氏菌
大肠埃希氏菌(大肠杆菌) 解淀粉芽孢杆菌
尖鳞黄伞 凸形假单胞杆菌
法氏柠檬酸杆菌 动胶菌 Zoogloea sp.
华根霉 寡养单胞菌 Stenotrophomonas sp.
铜绿假单胞菌冻干粉 苏云金芽胞杆菌莫氏变种 Bacillus thuringiensis var. merrisoni
青枯假单胞菌 刺孢吸水链霉菌
苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki 露湿漆斑菌
克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）20 次费用猴头菌 越南伯克霍尔德氏菌
血琼脂平板(BAP)[血平板]70mm 玫瑰红琼脂培养基90mm
绿针假单胞菌 多主枝孢(蜡叶芽枝霉)
变异链球菌 弯曲芽孢杆菌
绿色链霉菌 不动杆菌 Acinetobacter sp.
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文献和实验研究人员的论文发表之路往往很难一帆风顺，也就是说，通常情况下，很少有论文一经投稿、审稿就直接被录用发表。 一般来说，在审稿后收到「小修（minor revision）」的修改意见，已经可谓是十分令人兴奋、皆大欢喜的情况了，论文已在很大程度上接近了被录用发表。然而，更多时候，稿件在经历同行评审之后，可能会连同大量的修改意见一起被返回给作者修改，也就是「大修（major revision）」，这意味着稿件难免要面临一番大动干戈、脱胎换骨的修改，即便如此，依然不能保证修改后的稿件能被顺利录用发表
假设样本数为35：1、采用测序方案：测序一类的公司都可以，生工，英骏，奥科等，你提供PCR产物，他们进行测序。2、采用TAQMAN或MGB探针方案：基康，复旦悦达，联合基因等，强烈建议不要采用这种方案，特贵。3、采用微测序方案：翼和生物。就是应用LDR连接酶的反应，发射荧光的进行检测的。效果和价钱比较：测序要你自己做PCR，但测序的好坏要看你PCR产物的质量和测序公司的能力，价格大概在50元左右，总花费大约：50*35*12+前期的PCR费用=2万多。TAQMAN和MGB探针方案只需要你提供
较高的经济效益。 四川省卫生防疫站有关四川省麻疹疫苗预防接种的分析。1973～1986年投资（包括固定成本－房屋、冷链设备；运转成本――工资、运输、消耗、能源等）共26 270 861元。其效益――减少病家费用、减少病家间接费用、减少连胜直接费用（节约门诊、住院的补贴等）共554055 121元。成本与效益之比为1：21.09。 又如以泌尿道感染的预防为例，将以往每年有2次以上尿路感染的患者分为二组，一组给予复方SMZ预防，另一组给予安慰剂，治疗组发作次数0.15次
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