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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
34
- 英文名：
DH10B 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.1 mL×10
1）DH10B 感受态细胞0.1 mL×10费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
以下是DH10B 感受态细胞0.1 mL×10费用的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
储存事项:
A. DH10B 感受态细胞0.1 mL×10费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. DH10B 感受态细胞0.1 mL×10费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) DH10B 感受态细胞0.1 mL×10费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化剂 )1g BL21 感受态细胞0.1 mL×10
Lipoic acid( 抗氧化剂 )0.5g BCECF AM1mg
L-NAME(eNOS 抑制剂 )200mg BCA 法蛋白定量试剂盒500 次
L-NMMA( 总 NOS 抑制剂 )5mg BAY11-7082(NF-κB 抑制剂 )2mg
Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制剂 )10mg ATP 溶液，2.5mM2mL
柱式质粒 DNAout50 次 无包被磁珠2mL
柱式质粒 DNAout100 次 无 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL300U
革氏阳性细菌质粒 DNAout50 次 蜗牛酶干粉5g
柱式无内毒素质粒 DNAout50 次 胃蛋白酶抑制剂溶液，1 mg/mL1mL
大提柱式质粒 DNAout 5次 微型离心管专用研磨杵 ( 有离心管 ) 50 套
兔抗 His 标签多抗，HRP 标记100μL RNase 抑制剂 ( 人源 )2500U
一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次 RNA 长效液1.5mL
一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次 RNA 洗脱液50mL
谷胱甘肽琼脂糖2mL RNA 洗脱液10mL
L- 谷胱甘肽 ( 还原型 )5g RNA 溶解液10mL
保加利亚乳杆菌 土曲霉
总状毛霉 多黏类芽孢杆菌
苏云金芽胞杆菌巴基斯坦亚种Bacillusthuringiensissubsp.pakistani 尖镰孢
西蒙氏柠檬酸盐琼脂斜面 30 支/盒 金黄色葡萄球菌冻干粉
双孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 噬糖盐红菌
短波单胞菌 黄柄曲霉
血琼脂平板(BAP)[血平板]90mm 椭圆酿酒酵母
副溶血性弧菌 枯草芽孢杆菌
人苍白杆菌 金龟子绿僵菌小孢变种
紫色链霉菌 灰树花
DH10B 感受态细胞0.1 mL×10费用汉逊德巴利酵母 黄萎轮枝孢 病原菌
巴氏葡萄球菌 绿色木霉 纤维酶活性较高
匍匐放射毛霉或雅致放射毛霉 绿色木霉 产纤维素酶
枯草芽孢杆菌黑色变种冻干粉 开尔乳杆菌
米氏硫胺素芽孢杆菌 苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种
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文献和实验Prior to getting cells:1) Turn on 42 deg bath. Takes about 30 min to reach 42 deg.2) Put 0.1 M sterile CaCl2 on ice.3) One tube of cells is good for several transformations.For two transformations:1) Put 10 μl of your ligation
血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南（DP349） ——中量全血操作流程（1-10 ml血样）
以下操作按照天根产品 DP349 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝或新鲜全血(本实验以10 ml人的新鲜全血（a）/抗凝血（b）分别为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl，10 μl ，200 μl ，1ml），15 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限
) Media LB or SOB medium for initial growth of culture LB (Luria-Bertani) Medium Per Liter: To 950 ml of deionized H2 O , add: Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g
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