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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 英文名：
TRIzol 伴侣
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50 次
1）TRIzol 伴侣50 次费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
以下是TRIzol 伴侣50 次费用的详细介绍点击了解更多RNA纯化产品：
储存事项:
A. TRIzol 伴侣50 次费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. TRIzol 伴侣50 次费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) TRIzol 伴侣50 次费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Tubulin-Tracker Red( 微管红色荧光探针 )40μL dCTP 溶液，2.5mM2mL
Zinquin 乙酯5mg dCTP 溶液，100mM0.5mL
1400W(iNOS 抑制剂 )2mg DB3.1 感受态细胞10×100μL
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL dATP 溶液，2.5mM2mL
Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)20μL dATP 溶液，100mM0.5mL
电泳级 MOPS100g 口腔采样拭子 50 支
剥离硅烷50mL 克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）20 次
亲和硅烷 25mL 克必隆零背景 T 载体20 次
电泳级甘油100mL 克必隆常态转化液20 次
电泳级二甲苯蓝 FF 溶液，1%10mL 克必隆 G 载体2μg
接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol 超级杂交液 ( 芯片 )10mL
接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol 超纯水100mL
接头 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol 常用PCR引物100uL
接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol 草杆菌 PCR Mix 4100 次
接头 DNA(pSma I)5nmol 彩色 Acryl 助沉剂1g
丙二酸钠培养基 英文名称； Malonate Broth 规格； 10
卫矛醇半固体琼脂 英文名称； Dulcitol Semisolid Agar 规格； 10
XLD培养基 英文名称； Xylose Lysine Desoxycholate Medium 规格； 250g
WS琼脂 英文名称； WS Salmonella Agar 规格； 250g
葡萄糖铵培养基 英文名称； Ammonium Dextrose Medium 规格； 250g
匹克氏肉汤基础A Pick’s Broth BaseA 100g
肉浸液肉汤培养基 Meat Infusion Broth 250g
叠氮钠葡萄糖肉汤 Azide Dextrose Broth 250g
乙基紫叠氮钠肉汤 Ethyl Violet Aziode Broth 250g
KF链球菌琼脂 KF Streptococcus Agar 100
TRIzol 伴侣50 次费用改良V-P培养基 用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验用途用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验。成分（g/L）胰蛋白胨 7.0g葡萄糖 5.0g氯化钠 5.0gPH值 6.5±0.1用 法称取本品17克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装试管，每管5ml，121℃高压灭菌10分钟备用。质量控制和典型特征蜡样芽孢杆菌在35℃培养48小时，加入V-P试剂及肌酸数滴，静止1小时，溶液变为伊红色，为阳性反应。
胰酪胨大豆羊血琼脂基础 用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试验用途用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试验。成分（g/L）胰酪胨 15.0g大豆胨 5.0g氯化钠 5.0g琼脂 15.0gPH值 6.8-7.2用 法称取本品4.0克，加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中，分装烧瓶，每瓶100ml，121℃高压灭菌15分钟，冷至45－50℃时加入5ml无菌脱纤维羊血，混匀后倾注平板，每平皿18-20ml.质量控制和典型特征在30-32℃培养18-24小时，蜡样芽孢杆菌典型特征为在菌落周围呈现β型完全溶血的溶血环。
酪蛋白琼脂 用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验用途:用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。成分(g/L)酪蛋白 10.0牛肉浸粉 3.0氯化钠 5.0磷酸氢二钾 2.0琼脂 15.0溴百里香酚兰 0.05pH值7.4 ± 0.1 25℃用法称取本品 35.0g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 20 分钟,备用。注：酪蛋白不溶解,本培养基有沉淀物。
酚红葡萄糖肉汤 用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验（SN标准）用途用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验。成分（g/L）月示胨 10.0g牛肉膏 1.0g氯化钠 5.0g葡萄糖 5.0g酚红 0.018gpH值 7.4±0.1用 法称取本品2.1克，溶解于100ml蒸馏水中,分装试管，每管3ml。121℃高压灭菌10分钟备用。质量控制和典型特征接种蜡样芽孢杆菌，厌氧条件下35℃培养24h，培养基由红色变为黄色。
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文献和实验假设样本数为35：1、采用测序方案：测序一类的公司都可以，生工，英骏，奥科等，你提供PCR产物，他们进行测序。2、采用TAQMAN或MGB探针方案：基康，复旦悦达，联合基因等，强烈建议不要采用这种方案，特贵。3、采用微测序方案：翼和生物。就是应用LDR连接酶的反应，发射荧光的进行检测的。效果和价钱比较：测序要你自己做PCR，但测序的好坏要看你PCR产物的质量和测序公司的能力，价格大概在50元左右，总花费大约：50*35*12+前期的PCR费用=2万多。TAQMAN和MGB探针方案只需要你提供
1. 关于 Trizol 的购买： 目前市面上买的大多是 100 ml 装的，比较出名的是 Invitrogen 公司的 Trizol，100 ml 原装的据说要 1200 大洋以上，不过有一种据说香港分装的，只需 600 元，但是相对国产品牌三四百元的价格还是贵了一些。国产很多公司都有类似的 Trizol 试剂，价格大多三百多元，成分都差不多，可以说都是 invitrogen 的山寨产品。比如我用的是北京一家公司的，四百多，做出来也还不错。Takara 有一款专门提取 small
Procedure 1. Homogenize cells (10 million) or tissue (50-100 mg) in 1 mL TRIzol Reagent (e.g. scrape and pass through 30G needle, dounce homogenize and pass through needle, or use a homogenizer) and transfer to a 1.5 mL tube.
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