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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
53
- 英文名：
EGY48 酵母感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10×100μL
(1) EGY48 酵母感受态细胞10×100μL规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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储存事项:
A. EGY48 酵母感受态细胞10×100μL规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. EGY48 酵母感受态细胞10×100μL规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
RNA 洗脱液10mL 制霉菌素溶液 ,2mg/mL10mL
RNA 洗脱液50mL 植物总蛋白质微量提取试剂盒 (SDS-PAGE)30 次
RNA 溶解液10mL 植物总蛋白质微量提取试剂 (2DE) 30 次
植物总蛋白质微量提取试剂 (2DE) 100 次
RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL 植物种属鉴定 PCR Mix 9100 次
DNA 电泳分子量标准 (100-600 bp)50 次 去离子甲酰胺100mL
DNA 电泳分子量标准 200-1500 bp)50 次 去垢剂去除树脂10mL
DNA 电泳分子量标准 (100-200 bp)50 次 巯基磁珠 2mL
DNA 电泳分子量标准 (200-5000 bp)50 次 琼脂糖100g
DNA 电泳分子量标准 (250-1500 bp)50 次 青霉素 G 盐溶液10mL
人内皮细胞分离液 1.060200mL 15mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个
人 NK 细胞分离液 1.062200mL 1400W(iNOS 抑制剂 )2mg
人单核细胞分离液 1.075200mL 10nt 随机引物，0.5μg/μL5μg
人淋巴细胞分离液 1.077200mL 0.5mLDNA 离心超滤管 (300-500 KD)1个
人淋巴细胞分离液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL 0.5mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个
表面培养基60mm/25cm2 蜃楼耶尔森氏菌
假交替单胞菌 尿素八叠球菌
紫色孢囊杆菌 苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae
掷抱酵母 假芝
康宁木霉 屎肠球菌(屎链球菌)
惰性解油螺旋菌 生孢梭菌（产芽孢梭状芽孢杆菌） ATCC 11437
沙保罗琼脂平板70mm 杆菌 ATCC 11827
烟曲霉 善变副球菌
师岗链霉菌 粪链球菌
玫瑰红琼脂培养基90mm 粗壮假丝酵母
EGY48 酵母感受态细胞10×100μL规格红霉素链霉菌 银耳、白木耳
霍乱弧菌 栖土曲霉
普通变形杆菌AS1.1527冻干粉南京便诊 亚黄八叠球菌
银耳、白木耳 乙型溶血性链球菌
假结核耶尔森氏菌 黄直丝链霉菌
服务流程：
1）EGY48 酵母感受态细胞10×100μL规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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