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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
45
- 英文名:
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5次
(1) 填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次费用的详细介绍点击了解更多探针标记及检测产品:

储存事项:
A. 填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次费用组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
盐酸多佐胺;盐酸杜塞酰胺(标准品)130693-82-2质量规格:HPLC>98%,标准品
甲磺酸多沙唑嗪77883-43-3质量规格:>99%,BR
甲磺酸多沙唑嗪(标准品)77883-43-3质量规格:HPLC>98%,标准品
盐酸多柔比星/盐酸阿霉素25316-40-9质量规格:>98%,BR
盐酸多柔比星/盐酸阿霉素(标准品)25316-40-9质量规格:HPLC>98%,标准品
月桂酰-DL-肉毒碱氯化物Lauroyl-DL-carnitine chloride质量规格:美国进口
1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-胆碱磷酸1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine质量规格:美国进口
更昔洛韦钠盐Ganciclovir Sodium Salt质量规格:美国进口
(S)-更昔洛韦-5'-三磷酸锂盐(S)-Ganciclovir-5’-triphosphate Lithium Salt质量规格:美国进口
更昔洛韦-d5Ganciclovir-d5质量规格:美国进口
吲哚菁绿质量规格:>94%,BSIndocyanine Green
靛蓝质量规格:BSIndigotin
甲基蓝质量规格:ARMethyl blue
伊文思蓝;埃文斯蓝质量规格:BS,进分BIOFER,>85%Evans Blue
曲利苯蓝质量规格:BSTrypan Blue
Hyphomonasadhaerens 淡紫青霉
粗壮假丝酵母 红色红曲霉
白球拟酵母 梨形毛霉
荚膜红细菌 乳链球菌
产色链霉菌 尿素八叠球菌
苍白芽孢杆菌 英诺克李斯特氏菌
鳆发光杆菌 乙型副伤寒沙门氏菌
多主枝孢 岛青霉
藤黄八叠球菌 变异链球菌 对红霉素、利福平、利福霉素AMP、壮观霉素、链霉素敏感。血清型C。
酱油曲霉 斯氏梭菌 产
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次费用单核增生李斯特菌 白色念珠菌AS2.2086冻干粉南京便诊
苏云金芽胞杆菌苏云金变种 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis 酪梭菌
酵母 微黄八叠球菌
黄直丝链霉菌 裂褶菌
鲍氏志贺菌冻干粉 施氏假单胞菌
服务流程:
1)填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次费用客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
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文献和实验一、原理淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下,产生增殖反应,DNA和RNA合成明显增加,如在培养液中加入3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇(2-ME)、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A(ConA)、Hank's液、PBS缓冲液(pH7.2-7.4)、3H-TdR、闪烁液[2,5-二苯基恶唑(PPO)0.5g、1,4-双-(5-苯基恶唑基)-苯
,例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等,常用的载体一般为质粒;根据需要可直接从公司购买合适的载体,也可以自己构建。(3)连接:目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体,使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同,产生三种连接方式:粘端连接、平端连接和不相配的连接。(4)转化:将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞,使其在宿主细胞内复制扩增或表达,赋予宿主细胞新的生物特征。(5)克隆化:重组 DNA 分子转化大肠杆菌后,在平板
实验原理 混合淋巴细胞培养或称混合淋巴细胞反应(MLR)是将二个无关个体的淋巴细胞混合在一起培养,由于二者的淋巴细胞膜上的组织相容性抗原不同,可互相刺激,导致对方的淋巴细胞分裂增殖和转化。转化的淋巴母细胞表现为细胞体积增大,核内DNA和胞浆内RNA合成增加等。可通过形态学方法计数转化的淋巴细胞百分数,也可通过测定激活的淋巴细胞摄取DNA合成的前体-3H标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入量的多少来判定。同位素标记法较为客观,重复
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