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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
磁珠法 mRNA 提取试剂盒
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
25 次
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
点击了解更多RNA纯化产品:
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次规格详细介绍:
操作步骤:
1. 磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次规格的相关产品:
RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制剂 )2g
NP-40 裂解液100mL Sodium Butyrate(HDAC 抑制剂 )1g
动植物总蛋白微量提取试剂盒50 次 SOD( 抗氧化酶 )65KU
动植物膜蛋白微量制备试剂盒50 次 SNP(NO 供体 )1g
动物细胞核蛋白微量制备试剂盒25 次 SMT(iNOS 抑制剂 )100mg
三合一 RNA 上样液 ( 无 EB) 1.5mL 少突胶质前体细胞生长因子5mL
DNA 碱性胶上样液 ,6×1.5mL 上皮细胞生长因子5mL
DNA 碱性胶上样液 ,6×10mL 上皮细胞生长因子 -25mL
miRNA 尿素 -PAGE 上样液 ,6×1.5mL 三合一 RNA 上样液 ( 无 EB) 1.5mL
miRNA 尿素 -PAGE 上样液 ,6×10mL 三合一 RNA 上样液 ( 含 EB) 1.5mL
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少突胶质细胞生长因子5mL DNA 修复混合液 30 次
神经元生长因子5mL DNA 修复混合液 150 次
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麦康凯琼脂培养基(颗粒) 英文名称; 规格; 250g
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大豆酪蛋白消化物卵磷脂吐温80琼脂培养基(SCDCPA) 英文名称; 规格; 250g
营养肉汁琼脂 英文名称; 规格; 250g
葡萄糖琼脂斜面管 英文名称; 规格; 20支/盒
乳酸杆菌糖发酵培养基 Lactobacillus Carbohydrate Fermentation Medium 250g
BBL液体培养基 BBL Liquid Medium 250g
酸化MRS琼脂(AMRSA) Acidification MRS Agar 250g
GYP白亚琼脂培养基 GYP Medium 250g
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磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次规格结晶紫中性红胆盐琼脂平板(9cm) 用于大肠菌群的固体平板检测用于大肠菌群的固体平板检测
MFC琼脂平板(9cm) 用于大肠菌群的滤膜法检测用于大肠菌群的滤膜法检测
Baird-Parker琼脂平板(9cm) 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养
孟加拉红培养基平板(9cm) 用于食品中霉菌及酵母菌总数测定用于食品中霉菌及酵母菌总数测定
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文献和实验mTRAPTMMaxi 晶美 23096 96次 9605 mTRAPTM 96 23097 96次 11815 mTRAPTM 96 w/MAG-96 promega Z5420 15 isolations 420 PolyATtract® mRNA Isolation System III with Magnetic Stand Z5400
微量样品基因组 DNA 提取试剂盒操作指南(DP316)——少量血液
于-20℃,此时该溶液的浓度为1 µg/ μl;该储存液应避免反复冻融,冻融次数不能超过 3 次。本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
微量样品基因组 DNA 提取试剂盒操作指南(DP316) ——血清血浆
以下操作按照天根产品 DP316 微量样品基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 100 μl以内抗凝全血(本实验以血清为例)2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液 PW 和 GD 中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签
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