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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
46
- 英文名：
T1 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10×100μL
1）T1 感受态细胞10×100μL费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
以下是T1 感受态细胞10×100μL费用的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
储存事项:
A. T1 感受态细胞10×100μL费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. T1 感受态细胞10×100μL费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) T1 感受态细胞10×100μL费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
PCR 抑制物清除剂1mL 天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20 次
PCR 污染清除剂500mL 陶瓷研钵 ( 直径 75 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱系列 ( 小提 )50 套 陶瓷研钵 ( 直径 60 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱 ( 小提 ) 收集管50 只 糖蛋白染色试剂盒10 次
硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 )1套 糖蛋白蛋白纯化试剂盒50 次
一站式 DNA 非变性 PAGE 电泳套装30 次 水饱和10mL
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TAE 电泳液 ,50×250mL 双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次
TAE 电泳液 ,50×2500mL 石蜡油，PCR 级10mL
羧基磁珠2mL 溶液 ,50mg/mL1mL
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巯基磁珠 2mL 随机引物法 DNA 探针标记试剂盒5次
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比基尼链霉菌 黏质沙雷菌冻干粉
凤尾菇、漏斗状侧耳 抗辐射不动杆菌
罗斯酵母 不动杆菌属
惰性解油螺旋菌 凸圆灵芝(白芝)
沙保罗琼脂平板70mm 香蕉炭疽盘长孢菌
多形鲁氏酵母 葱头伯克氏菌
厚孢根霉 奇异翅孢壳
构巢曲霉 青色链霉菌
大豆慢生根瘤菌Bradyrhizobiumjaponicum 褐球固氮菌
缺陷假单胞菌ATCC19146冻干粉 藤黄八叠球菌
T1 感受态细胞10×100μL费用黑曲霉菌CMCC98003冻干粉 戊糖乳杆菌
斯氏油脂酵母 光滑念珠菌KTCC0001冻干粉
沙门氏菌IV 头状丝孢酵母
银白杨盘长孢 抗辐射链霉菌
苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis 双歧双歧杆菌
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文献和实验由江上不二夫等从米曲霉（Aspergillus oryz-ae）的高峰淀粉酶中分离提纯的、具有鸟嘌呤特异性的核糖核酸酶，缩写为 RNA酶 T1 ． EC3． 1． 4． 8。分解 RNA时首先可逆地切断与 3′ -鸟苷酸残基相邻的核苷酸间磷酸二酯键，中间形成具 2′， 3′ -cGMP和以 2′， 3′ -cGMP为末端的寡核苷酸，随之进行不可逆的解而产生以 3′ -GMP和以 3′ -GMP为末端的寡核苷酸。自从 R． W． Holley等人用此酶决定 tRNA的核苷酸排列以来，它成为
RNase A/T1 mapping provides a sensitive and quantitative method of expression analysis of known gene sequences. It differs from primer-derived analyses such as primer extension and reverse transcriptase-PCR by the use of a probe
相关专题 RNA酶T1为一内切核糖核酸酶 。它特异地作用于鸟嘌呤核苷酸3"端磷酸并切割与相邻核苷酸相连的磷酸二酯键。反应的终产物为鸟嘌呤核苷3"磷酸及末端带鸟嘌呤核苷3"磷酸的寡核苷酸(Davidson 1972)。 用途 去除DNA-RNA杂交体中未杂交的RNA区。
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