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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10g
服务流程:
1)RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g规格客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
储存事项:
A. RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g规格组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
动物 DNAout100mL 一站式柱式 miRNAout50 次
动物 DNAout250mL 一站式植物 mRNAout25 次
柱式动物 DNAout50 次 一站式真菌 mRNAout25 次
磁珠动物 DNAout50 次 一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)30 次
Southern 级动物 DNAout5次 一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次
6nt 随机引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL 动物种属鉴定 PCR Mix 1100 次
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次 动物线粒体总蛋白提取剂盒50 次
两管式 RT-PCR 试剂盒 (AMV-Taq)50 次 动物细胞裂解液 B50mL
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth)50 次 动物细胞裂解液 A50mL
双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次 动物细胞核蛋白微量制备试剂盒25 次
电泳级溴酚蓝溶液10mL 克必隆 B 载体2μg
电泳级橙黄 G 溶液10mL 可溶性两性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL
PAGE 胶长加样枪头1盒 可逆性锌染试剂盒1套
水饱和醇10mL 可逆性铜染试剂盒1套
预混型丙 - 甲叉双丙烯干粉 (19:1)100g 可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制剂0.3mL
综合马铃薯培养基 英文名称; Intergrated Potato Medium 规格; 250g
麦芽汁培养基 英文名称; Malt Extract Medium 规格; 250g
YPD液体培养基 英文名称; YPD Broth 规格; 250g
酵母浸出物葡萄糖土霉素琼脂培养基 英文名称; Yeast Extract Glucose Oxytetracycline Agar 规格; 250g
马铃薯葡萄糖半固体琼脂 英文名称; Potato Dextrose Semisolid Agar 规格; 250g
蜡样芽孢杆菌显色培养基(第三代) 1000ml
即用型平板培养基
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)平板 9cm*10/包
血平皿(9cm) Blood Agar Plates 无
哥伦比亚血琼脂平板(9cm) Columbia Blood Agar 5个/包
RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g规格XLD培养基平板(9cm) 选择性培养基,主要用于分离志贺氏菌属,亦可用于分离沙门氏菌选择性培养基,主要用于分离志贺氏菌属,亦可用于分离沙门氏菌
中国蓝琼脂平板(9cm) 弱选择性培养基,用于肠道致病菌的选择性分离弱选择性培养基,用于肠道致病菌的选择性分离
麦康凯琼脂平板(9cm) 用于肠道致病菌的选择性分离、培养用于肠道致病菌的选择性分离、培养
山梨醇麦康凯琼脂(SMAC)平板(9cm) 用于大肠杆菌O157的分离培养用于大肠杆菌O157的分离培养
实验步骤:
(1) RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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, JM. et al. RNA transcripts stimulate homologous recombination by forming DR-loops. Nature (2021). https://doi.org/10.1038/s41586-021-03538-86. Zegarra-Ruiz, D.F., Kim, D.V., Norwood, K. et al. Thymic development of gut-microbiota-specific T cells
by dissolving 5 gr. of glycogen (from Oyster, Sigma G 8751) in 10 ml of milli-Q water. Extract once with one volume of Phenol followed by one extraction with one volume of Chlorophorm. Add one volume of absolute ethanol to the supernatant, at this point
in Neurospora crassa. Fungal Genet. Biol. 4 1 , 1 016-102 4 . 10. Ham m ond, S. M ., C au d y, A. A. and Hannon G. J. (2 0 0 1 ) P o st-tran scrip tio n al gene silencing by doublestrand ed RNA. Nature Rev, Genetics 2 ,
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