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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
42
- 英文名：
BL21-CodonPlus(DE3) 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10×100μL
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是BL21-CodonPlus(DE3) 感受态细胞10×100μL费用的相关产品：
NAC( 抗氧化剂 )2g AICAR(AMPK 激活剂 )5mg
Nicotinamide(Sirt1 抑制剂 )10g AH109 酵母感受态细胞10×100μL
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )5mg AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL
NS-2028(sGC 抑制剂 )1mg AG490(JAK 抑制剂 )5mg
NS-398(COX-2 抑制剂 )1mg AEBSF 溶液，10mg/mL5mL
PCR 抑制物清除剂1mL 天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20 次
PCR 污染清除剂500mL 陶瓷研钵 ( 直径 75 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱系列 ( 小提 )50 套 陶瓷研钵 ( 直径 60 mm)1个
硅胶膜离心吸附柱 ( 小提 ) 收集管50 只 糖蛋白染色试剂盒10 次
硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 )1套 糖蛋白蛋白纯化试剂盒50 次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.01 mL
DAB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 9 mL
TMB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL
ECL 法生物素杂交检测试剂盒5次 环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次
贝酵母 产朊假丝酵母
生孢梭菌冻干粉 红平红球菌
棉花立枯菌 紫色小单孢菌(绛红小单孢菌)
伴放线放线杆菌 多粘芽孢杆菌
顶头孢霉 巴氏醋杆菌巴氏亚种
多头被孢 亚膜汉逊酵母
云芝 大肠埃希菌冻干粉
细黄链霉菌 谷氨酸棒杆菌
肺炎克雷伯菌冻干粉 嗜肺军团菌
费氏志贺氏菌 温特曲霉
BL21-CodonPlus(DE3) 感受态细胞10×100μL费用黑化链霉菌 金头曲霉
鼠伤寒沙门菌冻干粉 粘液玫瑰单胞菌
大豆根瘤菌 栗酒裂殖酵母
泛养副球菌 光滑念珠菌冻干粉
酵米面假单胞菌(酵米面黄杆菌) 海滨芽孢杆菌
操作步骤:
1. BL21-CodonPlus(DE3) 感受态细胞10×100μL费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验Purification of dnEBNA-1/Soft from E. coli BL21 LysS
Inoculate 2ml of 5ml o/n culture of either p3133 (empty vector pET11a)or p3134 (dnEBNA-1/Soft)in E.coli BL21 LysS per 0.5L LB+ ampicillin (grow two 0.5L cultures of each) Incubate ~2hrs 37℃250rpm until OD600 = 0.4-0.6 Induce with 5ml 100mM ITPG
(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3
(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3
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