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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
55
- 英文名：
土壤 RNAout
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50 次
服务流程：
1）土壤 RNAout50 次规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 土壤 RNAout50 次规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 土壤 RNAout50 次规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
DNA 磷酸化试剂盒20 次 磁珠动物 DNAout50 次
DNA 去磷酸化试剂盒20 次 成纤维细胞生长因子5mL
克必隆 G 载体2μg 成纤维细胞生长因子 -25mL
克必隆 B 载体2μg 成纤维细胞生长因子 - 不含动物成分5mL
即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6，有 MCS)20 次 成骨细胞生长因子5mL
血液 DNAout150 次 一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 高 pH)30 次
柱式血液 DNAout50 次 一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 低 pH)30 次
柱式血液 DNAout200 次 一站式大提柱式 miRNAout5次
磁珠血液 DNAout50 次 一站式磁珠法植物 mRNAout50 次
柱式血液 DNA-RNAout50 次 一站式磁珠法真菌 mRNA 提取试剂盒50 次
一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 中 pH)30 次 IPTG 干粉2.5g
一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 低 pH)30 次 Ionomycin( 钙离子载体 )250nmol
高 pH 缓冲液套装30 次 Insulin18mg
中 pH 缓冲液套装30 次 Indo-1，五铵盐1mg
低 pH 缓冲液套装30 次 Indo-1 AM1mg
10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤 英文名称； 10% NaCl Trypticase Soy Broth 规格； 9ml*20支/包
10%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤 英文名称； 10% NaCl Trypticase Soy Broth 规格； 10ml*20支/包
李氏菌增菌肉汤（LB2） 英文名称； Listeria Enrichment Broth Base 规格； 9ml*20支/包
李氏菌增菌肉汤（LB1） 英文名称； Listeria Enrichment Broth Base 规格； 9ml*20支/包
胰酪胨大豆多粘菌素肉汤 英文名称； Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 规格； 10ml/支*20
纤维素刚果红培养基 Cellulose Cong Red Medium 250g
包姜氏培养基（不含琼脂） Bordet-Gengou Medium 250g
其它培养基
RS培养基(RS琼脂平板) RS Medium 100g
液体培养基 Liquid medium 250g
土壤 RNAout50 次规格噻孢霉素 每100ml无菌山梨酸麦康凯琼脂基础中加入1瓶噻孢霉素每100ml无菌山梨酸麦康凯琼脂基础中加入1瓶噻孢霉素（1.25ug），混匀，无菌分装于灭菌试管。
三糖铁（TSI）琼脂 生化培养基，用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选（GB标准）用途:用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选。成分(g/L)蛋白胨 15.0牛肉粉 3.0酵母粉 3.0氯化钠 5.0月示胨 5.0乳糖 10.0葡萄糖 1.0蔗糖 10.0酚红 0.025亚铁 0.2硫代钠 0.3琼脂 12.0pH值7.4 ± 0.1 25℃用法称取本品 64.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,加热煮沸 1分钟,分装于 16mm× 150mm 试管,121℃高压灭菌 15分钟制成斜面长 4-5cm,底部长2-3cm。
革兰氏染色液 用于细菌革兰氏染色试验1.涂片经火焰固定，加（结晶紫溶液）溶液A染1分钟，用清水冲去染液。2.加（碘液）溶液B染1分钟，水洗。3.加（脱色液）溶液C，不时摇动玻片约10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗。4.加溶液D，染1分钟，水洗。5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。
山梨醇麦康凯琼脂添加剂 每200mlHB0121培养基中添加1支（含头孢克肟0.01mg和亚碲酸钾0.5mg）每支添加于200ml山梨醇麦康凯琼脂基础中贮存：2-8℃条件下，保质期一年。
实验步骤：
(1) 土壤 RNAout50 次规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验一、DNA 提取 SDS 高盐法(方案1) 具体步骤: 称取1 g 土壤，放入研钵中，倒入适量的液氮，立即研磨；再倒入适量的液氮，研磨，重复3 次，使土壤颗粒研成粉末； 将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐[pH = 8.0 ] ，0.1 mol/L EDTA [pH 8.0 ] ，0.1 mol/L Tris-HCl [pH 8.0 ] ，1.5 mol/L NaCl ，1.0 % CTAB) 和50μl蛋白酶K(10 g/L ) 与5 g 土壤置于50 ml
SDS 高盐法(方案1) 具体步骤:称取1g 土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨;再倒入适量的液氮,研磨,重复3 次,使土壤颗粒研成粉末;将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐[pH = 8.0 ] ,0.1 mol/L EDTA [pH 8.0 ] ,0.1 mol/L Tris-HCl [pH 8.0 ] ,1.5 mol/L NaCl ,1.0 % CTAB) 和50μl蛋白酶K(10 g/L ) 与5 g 土壤置于50 ml 的离心管中,放入37 ℃恒温
，3 000 r/min离心1 min； (3) 结合Sephadex柱和PVPP柱：取100 μL粗DNA样品，经PVPP柱10 000 r/min离心1 min，再经Sephadex柱3 000 r/min离心1 min； (4) 商品纯化柱：使用3S DNA Purification Kit纯化柱，将100 μL粗DNA以PCR产物方式按照说明进行纯化，必要时使用BS缓冲液反复漂洗2~3次，30 μL ddH2 O回收。 0.8%琼脂
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