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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
48
- 英文名：
接头 DNA(pSma I)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5nmol
接头 DNA(pSma I)5nmol说明书详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是接头 DNA(pSma I)5nmol说明书的相关产品：
DNA UV 防护剂3g 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒20 次
DNA PAGE 胶回收试剂盒30 次 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次
DNA PAGE 胶回收试剂盒100 次 亮抑蛋白酶肽溶液，10 mg/mL1mL
柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒50 次 两栖类和爬行类动物种属鉴定 PCR Mix100 次
柱式 OLIGO 回收试剂盒50 次 两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次
非冻型血液 DNA 保存液250mL 长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(2-30KD)20L
非冻型尿液 DNA 保存液15mL 长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L
非冻型尿液 DNA 保存液100mL 杂交管 (35×300mm)1个
非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 ) 100mL 杂交管 (35×200mm)1个
非冻型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 ) 100mL 杂交管 (35×100mm)1个
预染蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0 KD)10 次 HDAC 抑制剂1g
蛋白胶微量回收试剂盒50 次 HB101 化学感受态细胞0.1mL×10
蛋白胶中量回收试剂盒5次 H-89.2HCL(PKA 抑制剂 )5mg
考马斯亮蓝 G-250 染液250mL H-89(PKA 抑制剂 )1mg
考马斯亮蓝 R-250 染液250mL GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL
白黄链霉菌 变绿粘球菌
尘埃芽孢杆菌 粉褶侧耳、粉红侧耳
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae 肺炎链球菌冻干粉
松生拟层孔菌 假单胞菌
齿双歧杆菌 印第安那亚种 Bacillus thuringiensis subsp. indiana
大秃马勃 黑曲霉 抗菌素测定菌．
糖化酵母 烟曲霉 分解纤维素
马其顿假丝酵母 缓冲蛋白胨水9ml 30 支/盒
嗜盐四联球菌 红曲霉
沙保罗琼脂平板70mm 绿脓假单胞菌(绿脓杆菌)
接头 DNA(pSma I)5nmol说明书干酪乳杆菌干酪亚种 小皮伞
紫色小单孢菌(绛红小单孢菌) 尖镰孢
解淀粉芽孢杆菌 苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis
金黄色葡萄球菌ATCC6538冻干粉 奇异变形杆菌ATCC35659冻干粉
木素木霉 大丽花轮枝孢
操作步骤:
1. 接头 DNA(pSma I)5nmol说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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文献和实验Clontech是cDNA合成技术的引领者，近年来SMART(Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)技术被公认为是微量RNA和单细胞RNA-seq的行业金标准。现在创新的DNA SMART技术将模板转换机制的优势拓展到了DNA分析，利用DNA SMART ChIP-Seq Kit无需接头连接即可构建ChIP测序文库，极大地缩短了实验进程。科学技术的发展有时需要突破实验技术的挑战，如何从染色质免疫共沉淀（ChIP）实验中获得的少量DNA制备新
组 DNA 的污染？ （1）菌体裂解和中和过程中,剧烈混合造成基因组 DNA 断裂所致。解决方法：温和地进行菌体的裂解和中和。 （2）加 Solution II 时操作时间过长，造成基因组 DNA 断裂所致。解决方法：将裂解步骤控制在5分钟内完成。 （3）细菌的质量差（反复冻融的细菌，陈旧的细菌，培养条件不合适的细菌等）中有许多断裂或降解而游离的基因组 DNA，使用生长良好的新鲜细菌。 6.加样时 DNA 飘出加样孔外？ 忽略或省略了高速离心以甩干残留的 Rinse B 的操作步骤。解决方法：按说明书
2.2.10 DNA微阵列法 Yan等2001年[40]将以分子杂交为基础的微阵列技术应用于DNA甲基化检测中，这种方法是基于杂交的寡核苷酸微阵列，是一种在基因组中寻找新位点的方法。包括用于整个基因组范围内扫描的差异甲基化（DMH）杂交（Huang等1999年[41]）和用于检测某个位点的甲基化特异性微阵列MSO（Gitan等2002年[42]）。前者类似于mRNA表达谱或cDNA微阵列，是CpG岛微阵列，后者类似于寡核苷酸微阵列，是针对CpG二核苷酸位点的甲基化特异性寡核苷酸微阵列[26
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