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- 2025年07月10日
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- 详细信息
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37
- 英文名：
一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20 次
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
点击了解更多蛋白质研究产品：
一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次品牌详细介绍：
操作步骤:
1. 一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次品牌的相关产品：
小鼠胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA试剂盒 ，英文名： TP ELISA Kit
兔子补体蛋白4(C4)ELISA检测试剂盒RabbitCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T
犬Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免疫试剂盒 Canine Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA Kit
英文名称humanPGE1ELISAKIT人前列腺素E1(PGE1)规格：96T/48T
蛋白激酶谱系完全分析技术试剂盒5次
Ratmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒 ，英文名： D-LDH ELISA Kit
大鼠心肌转录因子GATA4ELISA检测试剂盒Ratcardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 96T/48T
人Dickkopf 3(DKK3)免疫试剂盒 Human Dickkopf 3,DKK3 ELISA Kit
英文名称MouseBonemorphogeneticprotein4ELISAKit小鼠骨成型蛋白质-4(BMP-4)规格：96T/48T
冰冻切片抗酒石酸酸性磷酸酶(AP)活性染色试剂盒50次
RatAi-glucoprotein210,GP210ELISA试剂盒大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠胃泌酸调节素(OXM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人磷酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA试剂盒
Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒鸡白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
载玻片细胞ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乳酸杆菌肉汤培养基2730g用于维生素检测菌种的培养基
YT Broth-capsule 培养基 5capsules incubation media YT Broth-capsule 培养基 5capsules
沼泽红假单胞菌 用于腐乳生产. 支/瓶
胰蛋白胨大豆琼脂5kg/袋一种通用培养基，用于各种微生物的培养
BCYE琼脂平板 10个/包 用于军团菌的分离培养
乳酸杆菌肉汤培养基250g用于乳酸杆菌增菌培养
副溶血性弧菌增菌液 Vibrio parahaemolyticus Broth 用于副溶血性弧菌的增菌培养
大豆胨 Peptone From Soybean 250克 BR
溴紫琼脂(BPA)250g/瓶用于嗜热芽孢菌芽孢计数incubationmedia溴紫琼脂(BPA)250g/瓶用于嗜热芽孢菌芽孢计数
营养琼脂(琼脂20g) 250g 用途:用于样品中菌落总数的计数。
一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次品牌氯结晶紫增菌液250g用于副溶血性弧菌的选择性增菌培养(GB标准)
BSSA琼脂培养基 250g 用于果汁中嗜酸耐热菌的检测。
Littman 琼脂 Littman Agar 250 用于真菌的分离培养(Acumedia方法)
胆盐乳糖培养基250g/瓶用于大肠菌群的测定incubationmedia胆盐乳糖培养基250g/瓶用于大肠菌群的测定
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文献和实验有适合免疫沉淀IP的GST抗体吗？ 近年来在原核表达体系中，谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍，它的来源是日本血吸虫的25kDa大小的GST蛋白。GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便，以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可从细菌裂解液中提取，在不变性的条件下通过亲和层析得到。GST融合蛋白可被位点特异性蛋白酶裂解，从而除去GST蛋白。正是由于以上的优点，商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛
PBS+1%Triton-100润洗一次，将冻融融合蛋白GST-A与之混匀，4℃层析柜旋转结合1小时。 5：PBS+1%Triton-100洗3次，PBS洗3次。留取20ul（ PBS+Beads）作Offer。 6：同时，裂解真核融合蛋白B，去尽培养基，用PBS(RT)洗一次，加入300ul裂解液（以6well为例，PBS+1%Triton-100+ Cocktaier），4℃放置30分钟。 7：吹打收集至1.5mlEP管，超声破碎。13000rpm，15分钟，4℃离心取上清。
4 °C离心30 min，以分离上清和沉淀。1.5 ml 裂解缓冲液重悬沉淀。分别取10 μl上清和重悬液为样品。 7) 加入10μl谷胱甘肽琼脂糖4B 珠，4 °C孵育 1 hr并用 200 μl 1 x PBS洗3次。离心后收集上清。 8) 10 μl洗脱缓冲液(20 mM谷胱甘肽， 75 mM Tris pH 8.0, 150 mM NaCl)清洗柱子。 9) 每一步取的样品进行合适浓度的 SDS-PAGE，以确定表达纯化的条件和蛋白
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