接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5n

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服务流程：
1）接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol说明书客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol说明书组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Denhardt 溶液，50×100mL  甲酰胺，PCR 级5mL
鲑鱼精 DNA 溶液1mL  加 T 试剂盒50 次
鲱鱼精 DNA 溶液1mL  加 A 试剂盒50 次
小牛胸腺 DNA 溶液1mL  即用型长片段 PCR 试剂盒20 次
荧光尺1个  即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒50 次
RNA 级 CTAB ( 十六烷基基溴化铵 )100g  脂蛋白纯化试剂盒50 次
RNA 级 DEPC ( 焦碳酸 )10mL  脂蛋白 PAGE 染液1套
RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g  支气管上皮细胞生长因子5mL
RNA 级 EDTA·2Na ( 四乙酸二 )100g  支气道上皮细胞生长因子5mL
RNA 级 Guanidium HCl ( 盐酸胍 )100g  真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次  大鼠内皮细胞分离液 1.066200mL
古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次  大鼠淋巴细胞分离液 1.083200mL
草杆菌 PCR Mix 4100 次  大鼠粒细胞分离液 1.119200mL
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次  大鼠单核细胞分离液 1.082200mL
链霉菌 PCR Mix 6100 次  大鼠白细胞分离液 1.084200mL
白腐菌   鳆发光杆菌
红色红曲霉   多主枝孢
硫乙醇酸盐平板培养基90mm   藤黄八叠球菌
白色噬琼胶菌   固氮类芽胞杆菌 Paenibacillus azotoformans
变绿粘球菌   厚垣孢普可尼亚菌 Pochonia chlamydosporia
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum   大丽花轮枝孢
鲜橙曲霉   金霉素链霉菌
赭绿青霉   马链球菌兽疫亚种
豌豆根瘤菌   金黄色葡萄球菌(敏感菌株)ATCC25923冻干粉
空肠弯曲杆菌   粉红木霉
接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol说明书改良月桂基盐胰蛋白胨肉汤-万古酶素10ml 30 支/盒   人苍白杆菌
平盖灵芝(树舌)   金顶侧耳、榆黄磨、金顶磨
食酸菌   营养琼脂(NAP)[肉汤琼脂平板][空气平皿]90mm
猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种   菲律宾链霉菌
顶青霉   费氏志贺氏菌（福氏志贺氏菌)
实验步骤：
(1) 接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)