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- 2025年07月14日
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- 技术资料
- 库存：
29
- 英文名：
即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20 次
1）即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次品牌客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
以下是即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次品牌的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
储存事项:
A. 即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次品牌组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) 即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL Dansyl chloride 100mg
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次
Actinomycin D( 基因转录抑制剂 )1mg DAB 法生物素杂交试剂盒5次
AG490(JAK 抑制剂 )5mg Cyclosporin A( 免疫抑制剂 /PP2B 抑制剂 )50mg
AICAR(AMPK 激活剂 )5mg Cycloheximide
柱式细菌 RNAout50 次 柱式软体 RNAout50 次
柱式葡萄球菌 RNAout50 次 柱式软骨 RNAout50 次
柱式分枝杆菌 RNAout50 次 柱式葡萄球菌 RNAout50 次
柱式细菌 RNA-DNA 双提试剂盒50 次 柱式凝固血液 DNAout50 次
柱式 G+细菌 RNAout50 次 柱式尿液 DNAout50 次
柱式土壤 RNAout50 次 柱式微生物基因组 DNAout 50 次
真菌 RNAout50 次 柱式土壤 RNAout50 次
真菌 RNAout250 次 柱式土壤 DNAout50 次
柱式真菌 RNAout50 次 柱式探针纯化试剂盒10 次
柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒50 次 柱式水样 DNAout50 次
pH7.0-蛋白胨缓冲液100ml 球孢毛霉
浮游球衣菌 泡盛曲霉烟色变种
三七根腐病菌 Fusarium solani 萎蔫短小杆菌
鹿皮色曲霉 小刺青霉
弗氏链霉菌 白色念珠菌冻干粉
大肠埃希菌CMCC44102冻干粉南京便诊 黄绿链霉菌 Streptomyces flavoviridis
瑞士乳杆菌 青色吸水链霉菌 Streptomyces glaucohygroscopicus
白色假丝酵母 土生拉乌尔菌（土生克雷伯菌）
根霉属的菌 爪哇根霉
肺炎克雷伯菌冻干粉 顶头孢霉
即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次品牌副凝聚短状杆菌 平展米曲霉（米曲霉平展变种）
金黄色葡萄球菌 拟囊体侧耳、(鲍鱼菇)
佛罗里达侧耳、蚝菇 不动杆菌属
金龟子绿僵菌小孢变种 胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm/25cm2
大肠埃希菌冻干粉 香蕉炭疽盘长孢菌
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文献和实验in vitro8) Anneal oligo A and oligo B separately to T7 primer (TAATACGACTCACTATAGG) or toprimers that are complementary to oligoA and B.9) Use 2-3 ug annealed primer in a 20ul Ambion T7 Megashort script reaction Ambion Cat# 1354 (Follow Ambion’s protocol
1200氨基酸的蛋白的载体供选择对蛋白类型无限制 (与M13不同)可表达的蛋白的种类比M13系统更多。T7展示的蛋白(或多肽)输出无需经过分泌途径。像b-gal等之所以不能用M13这样的丝状噬菌体展示原因正在于此。序列非依赖型。毒性蛋白问题可选择高拷贝或低拷贝表达快速T7 生长快，节约克隆和筛查时间，3小时内即可形成噬斑。完整的文库包装效率高，文库代表性好。更强大的蛋白展示功能蛋白通过C-端融合表达而不是通常的N-端融合。插入片段被克隆到T7Select载体基因10 的C-端，因此，即使插入片段内含
有一个配制方法可以参考： 【X-gal溶液配制方法】X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。 也就是每1ML中称取20MG就行 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法，是根据载体
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