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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
31
- 英文名：
即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子，有 MCS)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20 次
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子，有 MCS)20 次费用详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子，有 MCS)20 次费用的相关产品：
AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL Wortmannin(PI3K 抑制剂 )0.5mg
EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL WGA 糖蛋白分离试剂盒10 次
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL Vinblastine( 长春新碱 )100μL
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL UTP 溶液，2.5mM2mL
AH109 酵母感受态细胞10×100μL UTP 溶液，100mM0.25mL
96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )1次 柱式酵母质粒 DNAout50 次
96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )5次 柱式酵母 DNAout50 次
96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )1次 柱式酱油 DNAout10 次
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次 柱式海洋动物 DNAout50 次
一站式柱式 miRNAout50 次 柱式骨骼 DNAout50 次
柱式凝固血液 DNAout50 次 一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次
FTA 血片 DNAout50 次 一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次
柱式冻存血液 DNAout50 次 一站式 DNA 尿素 -PAGE 电泳套装30 次
柱式冻存血液 DNAout250 次 一站式 DNA 非变性 PAGE 电泳套装30 次
血液线粒体和核 DNA 双提试剂盒 25 次 一站式 CTAB-PAGE 电泳套装30 次
pH7.0-蛋白胨缓冲液200ml 酿酒酵母 蛋白酶缺陷型。单倍体。
黄绿绿僵菌 白色假丝酵母(白色念珠菌) 血清型A。API验证；质量控制菌株
桃色欧文氏菌 0.5%葡萄糖肉汤100ml
0.1%蛋白胨水溶液200ml 脱氮付球菌
肠炎沙门氏菌肠炎亚种 吸水链霉菌紫色变种
大肠埃希菌冻干粉 橙色粘球菌
谷氨酸棒杆菌 大毛霉
嗜肺军团菌 拉曼被孢霉
温特曲霉 匍匐放射毛霉或雅致放射毛霉
大肠埃希氏菌 脱氮假单胞菌
即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子，有 MCS)20 次费用副球菌 坏死梭杆菌坏死亚种 模式菌株
杏鲍菇 Ohtaekwangiakoreensis 模式菌株
葡酒色被孢霉 大肠埃希菌ATCC35218冻干粉
苏云金芽胞杆菌托马诺夫亚种Bacillusthuringiensissubsp.toumanoffii 阴沟肠杆菌
粪肠球菌ATCC29212冻干粉 运动发酵单孢菌
操作步骤:
1. 即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子，有 MCS)20 次费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验有一个配制方法可以参考： 【X-gal溶液配制方法】X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。 也就是每1ML中称取20MG就行 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法，是根据载体
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：站酷海洛参考文献：1. Liu, T.Y., Knott, G.J., Smock, D.C.J. et al. Accelerated RNA detection using tandem CRISPR nucleases. Nat Chem Biol (2021).2. Larremore, D. B. et al. Test sensitivity is secondary to frequency and turnaround time for COVID-19 screening
表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素： （1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 （2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ （3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 （4） P/E 启动子/增强
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