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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
28
- 英文名:
无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100 次
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
点击了解更多核酸扩增产品:
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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十一烯酸锌
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骨抑制素酰胺,人Osteostatin amide (human)质量规格:>95%,BR
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英文名称MouseHIF-1αELISAKit小鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)规格:96T/48T
冰冻切片少突胶质细胞(OLIGODENDROCYTE)O4抗体免疫组化染色试剂盒10次
RatAzidothymidine,AZTELISA试剂盒大鼠叠氮胸苷(AZT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix100 次费用小鼠三叶因子3 英文名称: Mouse efoil Factor 3 规格: 48T/96T 英文缩写: TFF3
小鼠甘油三酯脂肪酶 英文名称: Mouse iglyceride Lipase 规格: 48T/96T 英文缩写: TGL
小鼠甘油三酯 英文名称: Mouse iglyceride 规格: 48T/96T 英文缩写: TG
小鼠状腺原酸 英文名称: T3 Mouse iiodothyronine 规格: 48T/96T 英文缩写: T3
操作步骤:
1. 无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix100 次费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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用ReadyMix TM PCR Reaction Mix 进行拟南芥SSLP (32 个样品+3 个对照) 一、PCR 采用SIGMA REDTaq® ReadyMixTM PCR Reaction Mix提供的 试剂 (包括20 mM Tris-HCl, pH 8.3, 100 mM KCl, 3 mM MgCl2, 0.002% gelatin, 0.4 M dNTP
人S 蛋白100B (S-100B) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中S 蛋白100B (S-100B) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 S 蛋白 100B (S-100B) 水平。用纯化的人 S 蛋白 100B (S-100B) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 S 蛋白 100
假设样本数为35:1、采用测序方案:测序一类的公司都可以,生工,英骏,奥科等,你提供PCR产物,他们进行测序。2、采用TAQMAN或MGB探针方案:基康,复旦悦达,联合基因等,强烈建议不要采用这种方案,特贵。3、采用微测序方案:翼和生物。就是应用LDR连接酶的反应,发射荧光的进行检测的。效果和价钱比较:测序要你自己做PCR,但测序的好坏要看你PCR产物的质量和测序公司的能力,价格大概在50元左右,总花费大约:50*35*12+前期的PCR费用=2万多。TAQMAN和MGB探针方案只需要你提供
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