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即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)2

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  • 上海研生
  • YS-0769RD
  • 进口、国产
  • 2025年07月14日
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    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      20 次

    实验要点
    1.即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次说明书CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
    2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
    3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。非冻型组织RNA保存液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
    储存事项:
    A. 在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
    B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
    C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

    以下是即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次说明书的详细介绍,点击了解更多克隆及表达产品:操作流程:
    1.即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次说明书根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
    2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
    3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
    4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
    详细介绍:
    产品细节图片1
    以下是即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次说明书的相关产品:
    PD-L1 / B7-H1 / CD274 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µL

     0.78-50 ng/mL 人CD177抗原(CD177 antigen)ELISA试剂盒
    NME1 / NDKA 抗體, 兔單抗 IHC-P    50 µg
     0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-1, 3-galactosyltransferase 1
    CD200R1 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test
     0.156-10 ng/mL 人辅肌动蛋白α3(ACTN3)ELISA试剂盒
     31.2-2000 pg/mL 人包含蛋白1的 LETMD1结构域(LETMD1) ELISA试剂盒
     1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class II histocompatibility antigen gamma chain
    CXCR3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg
     0.312-20 ng/mL 人FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)ELISA试剂盒
     15.6-1000 pg/mL 人神经介素S(NMS)ELISA试剂盒
    即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次说明书17-去乙酰基诺孕酯 17-Desacetyl Norgestimate 53016-31-2 质量规格:美国进口
    罗汉果皂苷IVa CAS 88901-41-1 规格: HPLC≥98%;10mg/支 订购|咨询
    左西孟坦 Levosimendan 141505-33-1 质量规格:美国进口
    甘草苷 CAS 551-15-5 规格: HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询
    利奈唑酮-d3 Linezolid-d3 1127120-38-0 质量规格:美国进口
    番泻苷D CAS 37271-17-3 规格: HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询
    (S)赖诺普利-d5 (S) Lisinopril-d5 83915-83-7 (unlabeled) 质量规格:美国进口
    D-氨基葡萄糖;D-氨基葡萄糖盐 CAS 66-84-2 规格: HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询
    (R)-赖诺普利钠盐 (R)-Lisinopril Sodium Salt 85955-59-5 质量规格:美国进口
    莱苞迪甙D; 莱苞迪苷D; 瑞鲍迪甙D CAS 63279-13-0 规格: HPLC≥95.50%,10mg/支 订购|咨询
    赖诺普利环己基类似物 Lisinopril Cyclohexyl Analog 1132650-67-9 质量规格:美国进口
    CAS  规格: 200mg 订购|咨询
     

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    • 【原创】入门级T载体构建过程

      按照TaKaRa的说明书,我用了Cool Start法,就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的,据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够,所以P了两管,分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求,pMD18T需要加入1 ul,而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol,换算一下,需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800

    • T7 siRNA protocol

      in vitro8) Anneal oligo A and oligo B separately to T7 primer (TAATACGACTCACTATAGG) or toprimers that are complementary to oligoA and B.9) Use 2-3 ug annealed primer in a 20ul Ambion T7 Megashort script reaction Ambion Cat# 1354 (Follow Ambion’s protocol

    • T7Select 噬菌体展示系统

      1200氨基酸的蛋白的载体供选择对蛋白类型无限制 (与M13不同)可表达的蛋白的种类比M13系统更多。T7展示的蛋白(或多肽)输出无需经过分泌途径。像b-gal等之所以不能用M13这样的丝状噬菌体展示原因正在于此。序列非依赖型。毒性蛋白问题可选择高拷贝或低拷贝表达快速T7 生长快,节约克隆和筛查时间,3小时内即可形成噬斑。完整的文库包装效率高,文库代表性好。更强大的蛋白展示功能蛋白通过C-端融合表达而不是通常的N-端融合。插入片段被克隆到T7Select载体基因10 的C-端,因此,即使插入片段内含

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