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- 技术资料
- 英文名:
Immobilon Western HRP
- 保质期:
一年
- 供应商:
广州东锐科技有限公司
- 保存条件:
2°C-8°C
- 规格:
2*50ml
产品名称:Immobilon Western HRP 底物
规格和货号:2 x 50 mL(WBKLS0100)
品牌:默克
原价:1080元
特价:762元
产品简介:
作为一种超灵敏试剂,Immobilon® ECL Western HRP底物具有较长的信号持续时间,可用于检测western免疫印迹上的辣根过氧化物酶 (HRP) 标记抗体。该试剂能够产生高强度信号。Immobilon® ECL Ultra底物可兼容PVDF和硝酸纤维素印迹膜,以及常用的缓冲液和封闭液。
使用指南:
Immobilon® ECL底物是一种高度稳定的双组份化学发光底物。混合后的工作液应避光放置在2–8°C环境中,可稳定保存长达1个月;
Immobilon® ECL底物极其灵敏。因此,为获得最佳的信噪比,可适当降低一抗和二抗的浓度;
使用前,应将Immobilon® ECL底物平衡至室温使用封闭液稀释抗体,可能会降低背景并提高灵敏度为避免产生高背景,应全程佩戴手套处理转印膜使用平头镊子(目录号XX6200006P)夹取转印膜,避免膜撕裂或留下夹痕切勿在任何封。
化学发光检测操作步骤:
每1 cm²的膜面积大约需要0.1 mL Immobilon® ECL底物。一些常用膜尺寸所需的底物体积如下所示:
印迹膜尺寸 ,Immobilon® ECL底物体积
7 × 8.4 cm,对应底物体积6 mL
10 × 10 cm,对应底物体积10 mL
8.5 × 13.5 cm,对应底物体积12 mL
1. 从冰箱中取出Immobilon® ECL Ultra底物,在室温下平衡至少20分钟。
2. 将溶液A和B按1:1的比例轻轻混合,制备工作液。避免剧烈搅拌。
3. 使用前,应避光保存。未使用的工作液应避光冷藏,可稳定保存长达1个月。
4. 将印迹膜放在干净的容器中或干净的塑料保护板上(蛋白质一侧朝上),并将Immobilon® ECL底物添加到印迹膜上。
5. 在室温下孵育印迹膜2-5分钟。
6. 吸干多余的底物,将印迹膜转移到干净的塑料保护板上,并用保鲜膜或等效物覆盖。
7. 使用CCD成像系统为印迹膜拍照,或将印迹膜放到胶片暗盒中并在合适的X射线胶片下曝光一定时间。
重要规格表
| 主要应用 |
|---|
| 西方蛋白印迹 |
| 描述 | |
|---|---|
| 产品目录编号 | WBKLS0100 |
| 商名 |
|
| 描述 | Immobilon Western HRP 底物,2 x 50 mL |
| 产品信息 | |
|---|---|
| 检测方法 | Chemiluminescence |
| 格式 | HRP |
| 应用 | |
|---|---|
| 应用 | Western blotting, dot/slot blotting |
| 主要应用 |
|
| 应用说明 | For use on immunoblots. |
| 尺寸 | |
|---|---|
| 膜覆盖范围 | 1000 cm² |
| 体积 | Luminol (50 mL) Peroxide solution (50 mL) |
| 产品使用声明 | |
|---|---|
| 使用声明 |
|
| 储存和货运信息 | |
|---|---|
| 存储条件 | 2–8 |
| 储存温度 | 2–8 °C |
| 包装信息 | |
|---|---|
| 数量 | 2 x 50 mL |
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1.需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05mol/LTris缓冲液(pH7.6); 0.3%
链以8个不同的部位结合于多肽。天然的酶所带的纯电荷极少;无游离的。—氨基,仅有2个可测出的组氨酸,6个赖氨酸似乎全被糖链外壳所遮盖。因此,HRP一般仅有1~2个可用于耦联的氨基。 根据HRP的催化特性,ELISA中一般使用过氧化氢(H2O2)作为HRP底物之一,在供氢体(即色原底物)存在时,HRP与H2O2的反应迅速而又专一。由图4可见,HRP被H2O2二价地氧化形成复合物I,而复合物I又可与氢供体的二步连续的单价相互作用而还原至起始状态。复合物Ⅱ是被氧化的带一个电子的中间产物,当H2O2过量
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