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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0511
- 2025年11月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
DNA meter for Southern Blot
- 库存：
870
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
大片段DNA分子量标准产品及特点：
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5 uL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
大片段DNA分子量标准运输及保存：
低温运输、-20° C保存，有效期一年。
使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5 uL。
大片段DNA分子量标准疑难解答
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。
大片段DNA分子量标准相关资料
琼脂糖凝胶形成的分子机制
Agarose(琼脂糖)是从Agar(琼脂，海藻细胞壁的成分)中纯化出来的非离子型的、主链由agarobiose（琼脂二糖）聚合而成的一种线性多糖，平均分子量为12000。琼脂二糖由1，3连接的β-D-galactopyranoseD-galactose(β-D吡喃半乳糖)和1，3连接的3，6-anhydro-a-L-galactopyranose(3，6脱水L-吡喃半乳糖)以1，3--β糖苷键连接而成双糖聚合物。琼脂糖加热溶解后在水溶液中是以randomcoil的状态存在。随着温度降低到45℃左右，两条琼脂糖聚糖链互相形成双螺旋。随着温度的继续降低，琼脂糖双螺旋相互以氢键交联再聚合成束，形成网络系统。由于琼脂糖不含有带电荷的基团，而且不吸附被分离的物质，很容易制备，故成为核酸电泳必不可少的工具。
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| L- 鸟氨酸 |
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文献和实验以λ/Hind III为代表的λDNA酶切片段用作电泳分析中的分子量标准，会发现电泳后分子量条带不对的问题。 解释原因如下：在Lambda DNA分子的左右臂存在着12个碱基组成的具有互补顺序的单链突出端-COS位点，COS位点的退火复性，在λDNA片段电泳分离时会出现问题，含左右臂片段在胶上应出现的地方条带会减弱或完全看不到，而复性的左右臂片段会结合成大的片段，即在较大的分子量区域内产生一个额外的条带，这就造成了不正常的带型。 解决以上问题的办法
一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性 通常所用的PCR方法都在两个方面有局限，即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu（Pyrococcus furiosus）DNA聚合酶，具有完整的3‘外切酶校读活性（3'-editing-exonuclease），可以将每个循环中碱基的错配率由10*-4降到10*-3，从而提高PCR产物的准确性。但它在扩增1.5-2.0 kb 片段时，效率比Klentaq l（Taq DNA聚酶N-末端缺失突变体，类似于E.coli DNA
mmol/L1 mmol/L dsDNA = 6.7 OD2601 mmol/L ssDNA = 10.0 OD2601 mmol/L ssRNA = 8.3 OD260(3)分子量：1个脱氧核糖核酸碱基的平均分子量为333 Daltons1个核糖核酸碱基的平均分子量为340 Daltons(4)核酸末端浓度：环状DNApmol ends = pmol DNA × number of cuts ×2线性DNApmol ends = pmol DNA ×(number of cuts ×
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