- ￥1248
- 邦景
- BJ-PJ6612
- 国产
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
500U
商品属性：
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| Bsu DNA聚合酶 大片段 | BJ-PJ6612 | 500U | 1248 |
描述：
Bsu DNA 聚合酶，来源于 嗜热脂肪芽孢杆菌 （Bacillus subtilis），系将 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 （Bsu） I 基因的前 296 个 AA 截去而得。该酶保留了 Bsu I 的 5´-3´聚合酶活性，但是缺失了 5´-3´ 核酸外切 酶结构域，该大片段自身缺失 3´-5´ 核酸外切酶活性，可 用于重组酶扩增。
组分
应用： 随机引物法标记
cDNA 第二条链的合成
单个 dA 的加尾
链置换的 DNA 合成
热失活：75°C，20min。
活性定义：在 37℃条件下，30min 内参入 10nmol 酸性
不容物定义为 1 Unit。
1X Bsu Reaction Buffer: 50 mM NaCl ，10 mM Tris-HCl
(Ph7.5) , 10 mM MgCl2 , 1 mM DTT
酶储存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM
DTT, 37.5% Glycerol.
储存：置于-20°C 可保存 2 年，避免反复冻融。
注意：(1) 由于缺乏 3 ´-5 ´核酸外切酶活性，Bsu DNA 聚合酶不能切除 3´未配对的突出末端，因而不适用于生成平齐末端。
(2) 25℃ 时 Bsu DNA 聚合酶保留 50% 的活性，是同温度下 Klenow 片段（3´-5´ exo-）的两倍。
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文献和实验一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性 通常所用的PCR方法都在两个方面有局限，即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu（Pyrococcus furiosus）DNA聚合酶，具有完整的3‘外切酶校读活性（3'-editing-exonuclease），可以将每个循环中碱基的错配率由10*-4降到10*-3，从而提高PCR产物的准确性。但它在扩增1.5-2.0 kb 片段时，效率比Klentaq l（Taq DNA聚酶N-末端缺失突变体，类似于E.coli DNA聚合酶
。 利用两种DNA聚合酶进行较大片段DNA的扩增 美国华盛顿大学医学院的Barnes WM等对前述问题进行了深入系统的研究，认为：PCR反应效率低最主要的原因是由于错配的碱基阻碍了延伸反应的正常进行，Pfu DNA聚合酶虽然可以通过“校读”功能纠正错配的碱基，但亦可能降解引物，尤其是在较长反应时间下；酶浓度较高时，反应效果更差。因此必需将Pfu DNA聚合酶的浓度控制在较低状态，同时配合使用Klentaq l等DNA聚合酶，这样既可以有效地去除错配，又可以使
一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性： 通常所用的PCR方法都在两个方面 有局限，即目标产物精确程度 和合成片段的大小 。Pfu(Pyrococcus furiosus)DNA聚合酶， 具有完整的3'外切酶校读活性（3'-editing-exonuclease） ，可以将每个循环中碱基的错配率由10*-4降到10*-3，从而提高PCR产物的准确性。但它在扩增1.5-2.0kb片段时，效率比Klentaq l (Taq DNA聚酶N-末端缺失突变体，类似
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