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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
48
- 保质期:
12 个月
- 供应商:
上海西格
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
200次(250ul×4支) /2500次(250ul×50支)
| 规格: | 200次(250ul×4支) | 产品价格: | ¥436.8 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 2500次(250ul×50支) | 产品价格: | ¥4992.0 |
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| XG-P2901 | DNA Marker Ⅰ(for PAGE) 分子量标准 | 200次(250ul×4支) |

浓 度:50ng/5μl
保存条件:融化后于4℃保存,-20℃永久保存。
产品说明:
本公司生产的DNA Marker均通过酶切质粒得到,该工艺生产的Marker背景干净、条带清晰,质量稳定且能实现对Marker精确定量。产品含有两种染料(二甲苯青加溴酚蓝)。
本产品为即用型产品,已含有1xLoading Buffer,可根据实验需要,直接取适量Marker进行电泳。
DNA Marker Ⅰ由7条DNA条带组成,DNA条带分别为:100bp、 200bp 、300bp、 400bp 、500bp 、600bp 、700bp。
银染方法:
一般加5μl跑电泳,根据胶孔大小可适当增加或减少上样量。
1.6% PAGE电泳。
2.卸胶到一个干净的平皿中。
3.用水冲三次,倒掉。
4.加入0.1%硝酸银染色,在脱色摇床上摇10-15分钟。
5.倒掉硝酸银溶液,用水洗3次。
6.加入新鲜配制的显色剂。
7.待条带出现,立刻倒掉显色剂,大量水冲洗,终止反应。
8.尽快拍照记录结果。
注意:
1.尽量用纯度高水。
2.不要用手接触胶,应带PE手套。

PCR反应基本步骤:
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
变性(Denaturation):
利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling):
在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension):
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。

PCR 反应需要使用哪些试剂?
一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;

公司供应的相关产品:
| 芝麻源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 | 血红蛋白α亚基ELISA试剂盒 HB-α免费代测试剂 |
| 平尾毛细线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | B细胞活化因子受体ELISA试剂盒 BAFF-R免费代测试剂 |
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| 丙型流感病毒PCR检测试剂盒 | E选择素ELISA试剂盒 |
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文献和实验mmol/L1 mmol/L dsDNA = 6.7 OD2601 mmol/L ssDNA = 10.0 OD2601 mmol/L ssRNA = 8.3 OD260(3)分子量:1个脱氧核糖核酸碱基的平均分子量为333 Daltons1个核糖核酸碱基的平均分子量为340 Daltons(4)核酸末端浓度:环状DNApmol ends = pmol DNA × number of cuts ×2线性DNApmol ends = pmol DNA ×(number of cuts ×
1、Marker选择标准(1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。(2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。2、常见问题分析Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带?A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳
pmol分子量100,000蛋白质=10μg 100pmol分子量50,000蛋白质=5μg 100pmol分子量10,000蛋白质=1μg 氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿 (5)蛋白质/DNA换算: 1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质 10,000MW蛋白质=270bp DNA 30,000MW蛋白质=810bp DNA 50,000MW蛋白质=1.35kb 100,000MW蛋白质=2.7kb DNA4.常用蛋白质分子量标准参照
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