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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
336
- 英文名:
C-Myc plasmid(with CMV promoter)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1μg
特别提示:包括C端Myc标签融合蛋白质粒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:C端Myc标签融合蛋白质粒
英文名称:C-Myc plasmid(with CMV promoter)
产品货号:YT472
产品规格:1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3"端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-740 |
| c-Myc tag | 741-770 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 823-844 |
| SV40 polyA signal | 856-1239 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1377-1681 |
| bla promoter | 1706-1830 |
| SV40 promoter | 1850-2188 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2223-3014 |
| HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3015-3473 |
| pUC origin | 3602-4269 |
本质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
除了C端Myc标签融合蛋白质粒,,我公司还供应以下相关产品:
名称:大肠杆菌XL2-Blue感受态细胞
货号:BTN140376
规格:10*100μl
本产品为采用大肠杆菌XL2-Blue菌株经特殊工艺处理得到的大肠杆菌化学感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可109,-80℃ 保存几个月转化效率不发生改变。
基因型:Tet RΔ(mcr A)183 Hte[F′ {pro AB lac Iq lac ZΔM15 Tn10(TetR)Amy CamR}]Δ(mcr CB-hsd SMR-mrr)173 end A1 sup E44thi- 1 rec A1 gyr A96 rel A1
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
名称:AAT启动子荧光素酶报告基因质粒
货号:YT456
规格:1μg
AAT启动子报告基因质粒是用于检测AAT promoter转录活性水平的报告基因质粒。AAT启动子质粒是以pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human AAT的启动子序列,可以高灵敏度地检测AAT promoter的激活水平。
AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase,也简称为A1AT),又称serine peptidaseinhibitor,clade A,member 1或serine proteinase inhibitor,clade A,member 1(简称SERPINA1),是一种可以被分泌到细胞外的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可以抑制elastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷时会导致肺气肿(emphysema)或肝脏疾病等。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到zuì低。
AAT启动子质粒的主要信息如下:
| Base pairs | 6445 |
| AAT promoter | 20-900 |
| luc2 reporter gene | 946-2598 |
| SV40 late poly(A) signal | 2633-2854 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2902-3320 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase | |
| (Neor) coding region | 3345-4139 |
| Synthetic poly(A) signal | 4164-4212 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 4279-4298 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 4536 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 5327-6187 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 6292-6445 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 6394-6413 |
AAT启动子质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. AAT启动子可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
3. 可以激活AAT promoter的试剂,可以用作AAT启动子报告基因检测时的阳性对照。
储存条件:-20℃。
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文献和实验酶位点)和Linker(102bp)序列。NusA可以让超过95%的外源蛋白获得可溶性的原核表达,但NusA不具有氧化性,分子伴侣的功能比较低。 四,真核表达质粒 PVAX1,pEGFP-N2,pGL-3control,pMir-reportpCMV-Myc在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。QQ:2864609
。 5,改良版PET-NusA:带His标签(N端)+NusA(角质蛋白A) 说明:此载体表达的融合蛋白的N端带有His标签,可以通过一步亲和层析得到纯化,NusA(角质蛋白)与目的蛋白之间含有thrombin(凝血酶位点)和Linker(102bp)序列。NusA可以让超过95%的外源蛋白获得可溶性的原核表达,但NusA不具有氧化性,分子伴侣的功能比较低。 四,真核表达质粒 PVAX1,pEGFP-N2,pGL-3control,pMir-report pCMV-Myc
【求助】MDCK转染与免疫荧光问题,解决问题追加丁当,谢谢!
其功能,所以选择用标签染色的方法证实转染效果) 在每次免疫荧光之前我都会看一下GFP的荧光情况,有特异性的荧光表达。 然后我会对转染质粒的细胞进行染色。实验组的一抗我用的是c-myc,对照组1用的一抗为AQP1和c-myc,对照组3一抗用的是AQP1 试验结果:对照组3即阳性对照,能出现阳性结果,说明免疫荧光的操作没有问题。 对照组2,有GFP的荧光,说明至少转染GFP质粒没有问题。 但是,就是没法染出实验
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