C端HA标签融合蛋白质粒北京价格

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名称：C端HA标签融合蛋白质粒北京价格
品牌：百奥莱博
规格：1μg
英文名：C-HA plasmid（with CMV promoter）
编号：YT470
产地：国产|进口
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端与HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的3"端含有一个可以编码HA标签的序列，因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白，可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
multiple cloning site	680-740
c-HA tag	741-767
T7 promoter and T7 primer binding site	820-841
SV40 polyA signal	853-1236
f1 origin of ss-DNA replication	1374-1678
bla promoter	1703-1827
SV40 promoter	1847-2185
neomycin/kanamycin resistance ORF	2220-3011
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3012-3470
pUC origin	3599-4266

本质粒(5010bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。

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·PI3K抑制剂(LY294002)
编号：YT333
英文名称：PI3K Inhibitor
规格：10mg/ml×0.1ml|5mg|25mg
本品是一种常用的phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)抑制剂。LY294002可以通透细胞，特异性抑制PI3K，抑制PI3K/Akt信号途径，包括常见的抑制Akt磷酸化等。LY294002对于纯化的PI3K的IC50为1.4 μM。

CAS：154447-36-6
分子式：C19H17NO3
分子量：307.3
纯度：＞98%

储存条件：-20℃，有效期6个月。

·RNase A (100mg/ml)(不含DNase)
编号：YT006
英文名称：Ribonuclease A（DNase free）
规格：0.5ml
本品用于消化RNA，浓度为10mg/ml,不含DNase，可直接使用。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验。
储存条件：-20℃。

·T7 RNA聚合酶
编号：YT409
英文名称：T7 RNA Polymerase
规格：1000U
本酶来源于由大肠杆菌表达，表达基因为嗜菌体T7 RNA Polymerase基因，是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5"→3"RNA聚合酶。T7 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入，合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。

特点：T7 RNA Polymerase可以识别修饰的NTP，例如生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP，可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T7启动子有高度的特异性。

用途：用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义RNA合成，作为体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA等小RNA。

活性定义： 37℃60分钟内，催化1 nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml[3H]-ATP，20μg/ml plasmid DNA containing the specific T7 RNA Polymerase promoter sequence。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：50mM Tris-HCl(pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM Elugent，50% glycerol。
Transcription Buffer(5X)：200mM Tris-HCl(pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl，10mM spermidine。
失活或抑制：70℃加热10分钟可使T7 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使T7 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的*、*或铵盐可以显著抑制T7 RNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃


C端HA标签融合蛋白质粒北京价格关键词：C端HA标签融合蛋白质粒,YT470,C-HA plasmid（with CMV promoter）


·细胞凋亡阳性对照试剂盒
编号：YT119
英文名称：Apoptosis Inducers Kit
规格：200次
本试剂盒含有两种不同的细胞凋亡诱导试剂，试剂A和试剂B。细胞凋亡诱导试剂A(Apopida)和试剂B(Apobid)分别可以诱导Hela、HEK293、CHO、COS等常见细胞的细胞凋亡。

由于细胞凋亡的诱导具有细胞特异性，细胞凋亡的机制也具有一定的细胞特异性，尽管细胞凋亡诱导试剂A和试剂B可以诱导常见的一些细胞的细胞凋亡，但是我们无法保证这两种试剂可以诱导任何一种细胞发生凋亡。细胞凋亡诱导试剂A和试剂B相互补充，可以诱导更多种类的细胞产生凋亡。本试剂盒至少可用于检测200个样品。

试剂盒组份：

细胞凋亡诱导试剂A——————200μl
细胞凋亡诱导试剂B——————200μl

注意事项：对于不同的细胞，需要摸索细胞凋亡诱导试剂的不同浓度和诱导时间。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·HIF-1α凝胶迁移突变探针(1.75μM)
编号：YT226
英文名称：HIF-1α Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的HIF-1α consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－HIF-1α的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

HIF-1 α consensus oligo的序列如下：
5"-TCT GTA CGT GAC CAC ACT CAC CTC-3"
3"-AGA CAT GCA CTG GTG TGA GTG GAG-5"

EMSA突变探针－HIF-1α中HIF-1α的公认的结合位点发生了突变，从而使HIF-1α无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应中，正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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