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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
58
- 英文名:
pUCm-T Vector
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
20次
特别提示:包括pUCm-T载体在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:pUCm-T载体
英文名称:pUCm-T Vector
产品货号:YT441
产品规格:20次
UCm-T载体是用于克隆含有A末端PCR产物的理想载体。可以通过蓝白斑筛选有插入片段的重组克隆。很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在PCR产物双链DNA每条链的3’端加上一个突出的碱基A。pUCm-T载体是一种已经线性化的载体,载体每条链的3’端带有一个突出的T。这样,pUCm-T载体的两端就可以和PCR产物的两端进行正确的AT配对,在连接酶的催化下,就可以把PCR产物连接到pUCm-T载体中,形成含有目的片段的重组载体。
pUCm-T载体的主要信息如下
| Base pairs | 2773 |
| Lac Z promoter | 142-171 |
| M13/pUC Sequencing Primer | 204-221 |
| Lac Z | 222-534 |
| Multiple cloning region | 233-376 |
| M13/pUC Reverse Primer | 378-395 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 972-1832 |
| ColE1 origin of replication(rep) | 1987-2606 |
pUCm-T载体的图谱如图1:
储存条件:-20℃。
除了pUCm-T载体,,我公司还供应以下相关产品:
名称:即用型蓝白T载体C型(T7-T3,无MCS)
货号:BTN120513
规格:20次
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段,其两个末端的5′都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。
产品特点:
1. 由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为100%,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2. 克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。
3. 无Nde I和Nco I等多克隆位点,便于重组基因的克隆
4. 来源于pBlueSoript Ⅱsk(+),故克隆位点两侧分别有T7和T3 RNA聚合酶启动子,便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1复制起始子,可以制备单链DNA。
产品组成:
| 组分 | 规格 |
| 即用型蓝白T载体C型(10ng/μL) | 60μl |
| 阳性对照(35ng/μl) | 30μl |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
质粒图谱
名称:细胞松弛素B溶液
货号:BTN120686
规格:0.1mL
本产品为浓度为20mg/ml细胞松弛素B乙醇溶液。细胞松弛素(松胞菌素B;松孢素B;细胞分裂抑素B;Phomin),分子式:C29H37NO5,分子量:479.61,CAS号:14930-96-2 。溶于乙醇,可溶于DMSO细胞松弛素B是从真菌类中分离得到的代谢产物。是以希腊语的cytos(细胞)和chalasis(松弛)组合而命名的。
结构式:
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
名称:EDTA溶液(0.5M)(pH8.0)
货号:YT412
规格:100ml
本品为0.5M EDTA pH8.0用EDTA配制,用NaOH调节pH值至8.0,常用分子生物学试剂,用于螯合镁离子等。
储存条件:室温。
名称:TE Buffer
货号:YT415
规格:100ml
本品为10mM Tris,1mM EDTA,pH8.0的buffer,常用分子生物学试剂,用于DNA的溶解等。
储存条件:室温。
名称:C端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白)
货号:YT463
规格:1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含BFP(蓝色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个BFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有BFP标签的融合蛋白。利用BFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用BFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。BFP与GFP高度相似,可以尝试用GFP抗体检测BFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| BFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyA signal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
本质粒(5010bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
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文献和实验相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC质粒载体是重要的大肠杆菌质粒载体之一,一起看下pUCm-T质粒图谱 和序列吧。 pUCm-T质粒图谱 pUCm-T载体 序列
在丁香园见过很多大佬分享载体构建经验,所以我这里写的T载体构建只能算是入门级,给新手提供一点思路,有什么不足之处还希望大家多多指正。 我克隆的这个片段大小是1.8kb,用的是TaKaRa的LA-Taq酶做的PCR。 反应体系:5*buffer 5 ul MgCl2 5 ul dNTPs 8 ul Primer 1 1 ul Primer 2 1 ul LA-Taq 0.5 ul cDNA 1 ul (1ug左右基因组DNA) ddH2O up to 50 ul
Making the T-vector: 1.Digest 5 ug of vector DNA ( pBluescript & pUC18) with a restriction enzyme that generates a unique blunt end site, for example EcoRV or Sma I ( we prefere EcorV for it's stable activity at 37 C) for 2 hours at 37 C. 2.Run
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