细胞筛网

小鼠肿瘤样本单细胞悬液的制备及注意事项

基或者 PBS 稀释，再用 200 目筛网，除去残留的组织块，并使用5~10倍体积的 1640 基础培养基或者 PBS 缓冲液洗涤一次，过滤至无组织块为止，获得单细胞悬液。 收集细胞悬液，300 g离心5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 研磨法 提前准备好 200 目的一次性细胞筛网，用 1640 基础培养基或者 PBS 润湿并浸泡备用（浸泡放置于 6 cm 细胞培养皿或者 6 孔板）。 将剥离的肿瘤组织转移到 200 目的细胞筛网，用无菌眼科

类器官培养与应用——垂体瘤类器官

5 ml 组织解离液的离心管中，轻轻震荡混匀后，放置于 37℃ 培养箱中解离 5-10min，解离期间轻轻震荡或吹打混匀。然后将组织转移至含有 5ml 组织解离液II的离心管中，放置于 37℃ 培养箱中继续解离 5min。 5、解离后的组织用 D-PBS 清洗 2 次后，将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤，收集解离的细胞。 6、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 400g 离心 5min，收集细胞沉淀。 7、若细胞沉淀有明显的红色，则将细胞重悬于 5ml 的红细胞裂解液中，冰上孵育 10min

类器官培养与应用——结直肠类器官

基的离心管中，轻轻震荡混匀后，放置于 37℃ 培养箱中解离 1 h。每隔15min 轻轻震荡或吹打混匀一次。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12（含 10%FBS）终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤，收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 450g 离心 5min。 8、若细胞沉淀有明显的红色，则将细胞重悬于 5ml 的红细胞裂解液中，冰上孵育 10min 使红细胞裂解。 9、向细胞悬液中加入 5ml DMEM/F12 冲洗细胞一次，离心收集细胞沉淀后，加入