- ￥80 - 240
- 万生昊天/WSHT
- 美国
- EZWB03-1
- 2026年01月16日
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- 保存条件：
常温
- 保质期：
12个月
- 英文名：
WB Stripping buffer (Strong alkaline)
- 库存：
100
- 供应商：
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格：
100ml/500ml
| 规格： | 100ml | 产品价格： | ￥80.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ml | 产品价格： | ￥240.0 |
Western抗体洗脱液(Stripping buffer)又称膜再生液或Western一抗二抗去除液，用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer可以洗脱一抗二抗，非常方便地重新利用使用过的膜，检测其它蛋白。 Stripping buffer多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜，一般可以利用2～3次。
万生昊天 Western Stripping buffer 主要依靠强碱性来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失， 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用（如ECL发光液），尤其适用于PVDF膜，其次为硝酸纤维素膜。用本试剂只需大约15-20分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作.非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB，NBT/BCIP)不适用于本试剂。
保存条件：室温避光保存，12月有效。
注意事项：
- 使用辣根过氧化物酶标记的抗体时，封闭液必须使用5%脱脂奶粉配制。使用碱性磷酸酯酶标记的抗体时，封闭液必须使用酪蛋白(casein)配制。
- Western Stripping buffer(强碱性)特别适用于PVDF膜的再生，硝酸纤维素膜的再生效果不如PVDF膜。
- Western Stripping buffer(强碱性)适用于ECL等类似的化学发光液的检测后的一抗二抗洗脱。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB，NBT/BCIP)不适用于本试剂。
- Western Stripping buffer(强碱性)有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
- 在膜完成Western化学发光检测后，蒸馏水中漂洗5min
- 弃蒸馏水，加入抗体洗脱液，完全覆盖住膜。
- 摇床上漂洗5min。
- 弃液，尽量把抗体洗脱液去除干净，必要情况下，可以用滤纸吸干。
- 加入蒸馏水振荡漂洗2～3次，每次漂洗3～5min。
- 入封闭液进行封闭后(推荐酪氨酸或脱脂奶粉作为封闭液)，进行Western后续操作。
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文献和实验2，左条带为使用普通强裂解液提取的蛋白样品，右条带为柱式法提取的蛋白样品，可见使用柱式法法提取的样品胶孔中可明显改善样品滞留、拖带的情况发生。 图 2：同种样品分别使用裂解液法和柱式法进行 WB 样品制备，SDS-PAGE 电泳后考染图 图片来源：英文特 WB 蛋白样品制备过程中出现样品粘稠的情况并不代表样品提取失败，而是样品裂解较为充分的表现，但是如果放任不管则会引发一系列连锁效应，最终导致 WB 实验失败。选择合适的方法进行处理。成功获得高质量的蛋白样品，是 WB 实验成功必不可少
那么如何通过改变抗体稀释液的配方，寻求抗体孵育的最佳条件呢？首先要认清，抗体稀释液没有一个绝对通用的配方；一种抗体一个脾气。其次，抗体稀释液的配方要兼顾与特异性抗体竞争抗原的强度，以及对其他区域的封闭强度两方面的平衡。目前，抗体稀释液中可以充当封闭蛋白的主要有milk，BSA和gelatin，似乎很少的样子 。。。可是，你有没有考虑过“复方”？--这下配方无限多了吧。1. 采用milk，BSA和gelatin的单方。3% milk，5% BSA，2.很多情况下单方的浓度很高了，背景问题仍不能
woshibanli 我看好多文章都是通过提取组织来做wb 而我要做的是细胞 是否好做？因为时间紧所以想随便问一下 Akt 及p-AKT的wb是否好做？ ourlab 二抗孵育时间太长，会把一抗洗掉。应缩减至1小时。 我的PAKT信号总是很强。有时不得不只上样1ug，一抗和二抗孵育时间有时只能缩减至10分钟。http://www.dxy.cn/bbs/thread/21961528
