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- 广州市萝岗区
- 2025年07月14日
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- 服务名称：
免疫组织化学、常规病理技术
- 提供商：
广州朗日生物科技有限公司
技术服务详细描述
免疫组织化学、常规病理技术
原理：
免疫组织化学是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，如标记荧光素或荧光蛋白可构成免疫荧光组化技术，如标记酶（HRP或AKP）可构成免疫酶组化技术，如标记金或铁可构成免疫胶体金或胶体铁技术。
图示：左——右：平滑肌细胞ACTIN胞浆染色，心肌组织干细胞BrdU示踪，心肌组织Desmin染色
阳性结果分析与判定：
①表达部位：核，浆，膜
②分布：点，灶，弥漫
非阳性判定：
①细胞之间强度相同。
②累及一片细胞。
③切片边缘，刀痕或皱褶区域，坏死或挤压区，染色强，并相同无差别。
图示：左——右：心肌间质血管内皮VEGF胞浆染色，骨髓基质细胞PCNA核染色，上皮细胞P65细胞浆和核染色
免疫荧光技术：
常规病理技术：
TUNEL组化、荧光技术：
TUNEL即末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的的dUTP缺口末端标记（TdT-mediated X-dUTP nick and labeling）法，细胞凋亡时双链DNA会出现许多不对称的断裂点，暴露出3/-OH，TdT酶可催化生物素或荧光素等标记的脱氧核苷酸到3/-OH端，再通过免疫组化进行检测，观察形态，染色定位及在组织中分布。可用于细胞悬液，石蜡，冰冻切片和细胞涂片等多种样本检测。
图示：左上：间叶组织TUNEL生物素免疫组化 右上：管状上皮组织细胞TUNEL生物素免疫组化 左下：阳性对照 右下：细胞怕片TUNEL-FITC绿色荧光
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文献和实验免疫组织化学对照实验 由于影响免疫组织化学染色结果的因素甚多，染色中必须有对照实验，否则不可能正确评价染色结果。对照实验包括阴性对照、阳性对照和自身对照。在实践中可用染色组织切片中不含抗原的组织作为阴性对照．而用含抗原的正常组织 作阳性对照，这种自身对照具有节约的意义。观察染色结果时，先观察对照组织的结果，如阳性对照组织中阳性细胞呈强阳性，阴性对照细胞呈阴性，内源酶阴性，背景无非特异性染色时，表明本次实验的全部试剂和全过程技术操作准确无误，待检组织中的阳性细胞具有可信
免疫组织化学基本原理 直接法 直接法用酶或其他标记物标记的特异性抗体直接与标本中的相应抗原结合，再与酶的底物作用产生有色产物，沉积在抗原抗体反应的部位，即可对抗原进行定性、定位以至定量研究。直接法简便、快速且特异性强，非特异性背景反应低；其缺点是每种抗原必须分别用酶标记的特异性抗体，故很难获得各种市售标记特异性抗体。直接法敏感性较低，对组织或细胞内抗原量少的样品。难以达到检测目的。 免疫纽织化学直接法与间接法示意圈 三、间接法 第一抗体 不标记，使用
免疫组织化学染色结果评价 对免疫 组织化学染色所得结果的判断要持科学态度，根据对照实验准确判断阳性和阴性结果，排除假阳性和假阴性结果。为使实验结果准确无误，应多次重复进行实验。最后得出科学的结论。为达此目的，首先应学会区别特异性和非特异性染色结果。非特异性染色的特点是：细胞和间质染色无区别或间质染色更强；染色无特定部位，无结构性；染色五分布规律，某一部位均匀着色；染色出现在切片的干燥部位、边缘、刀痕或组织折叠处。排除非特异性染色之后，应确定特异性染色在组织细胞中的部位
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