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        免疫组织化学染色结果评价

        相关方法:免疫组织化学技术

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        免疫组织化学染色结果评价
         
            对免疫 组织化学染色所得结果的判断要持科学态度,根据对照实验准确判断阳性和阴性结果,排除假阳性和假阴性结果。为使实验结果准确无误,应多次重复进行实验。最后得出科学的结论。为达此目的,首先应学会区别特异性和非特异性染色结果。非特异性染色的特点是:细胞和间质染色无区别或间质染色更强;染色无特定部位,无结构性;染色五分布规律,某一部位均匀着色;染色出现在切片的干燥部位、边缘、刀痕或组织折叠处。排除非特异性染色之后,应确定特异性染色在组织细胞中的部位和程度,并且考虑是否有必要进行半定量测定。
        《一》以抗原表达模式定位
            1.细胞质内弥散性分布,多数免疫组织化学染色为胞质型阳性反应,如细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)和波形蛋白(Vimentin)等。
        免疫组织化学染色结果评价
        免疫组织化学染色(SP法。AEC显色)
        胚胎12天人员端脑背侧脑室区司见波形蛋L(Vimentin)免疫反应阳性细胞:其胞体位于脑室区。一端伸出长突起到达软脑膜
         
            2.细胞核周边胞质内分布,其判别要点是细胞核轮廓被勾画得很清楚,如CD3多克隆抗体的染色。
            3.胞浆内局限性点状阳性反应,如CDI$抗体的染色。
            4.细胞膜线性阳性反应,大多数淋巴细胞标志物的染色均如此,如CD20。
            5.细胞核阳性反应,如BrdU、Ki-67及雌、孕激素受体蛋白等。
            有些抗原的阳性表达可同时出现在细胞的不同部位,如细胞质和细胞膜等。
         
        《二》阳性染色结果定量
            1.计算免疫反应阳性细胞数方法是选择每个样品中10个非重叠视野,计算每个视野中的阳性细胞与总细胞数的百分比,取平均数,连续观察和计算至少二个条件相同的样品。得出数据经统计学处理后可在计算机Microsoft Excel中作出柱形图。
            2.另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定,一般阳性细胞数在0~25为阴性,25~50为+,50~75为++,75以上为+++。此种判定方法容易出现人为误差,现已很少在论文中出现。
            3.图像分析系统检测阳性结果。
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