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402
- 英文名:
Fast Site-Directed Mutagenesis Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
于-20℃条件下保存。感受态细胞-70℃
- 规格:
20次
特别提示:包括快速定点突变试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:快速定点突变试剂盒
英文名称:Fast Site-Directed Mutagenesis Kit
产品货号:WH0118
产品规格:20次
体外定点突变技术是当前生物、医学各领域研究中的一种重要实验手段,多用于改造、优化目的基因;探索启动子的调节位点;以及研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系。本试剂盒采用目前领先技术,可在目标载体上直接对靶基因进行单点突变,多点突变及插入或缺失突变,并且单点突变的突变率可达90%以上。另外,与以往的突变试剂盒需要多轮PCR及亚克隆等耗时耗力的步骤不同,本试剂盒的操作更为简便,从未突变菌株到突变菌株的构建只需要4步,如下图所示:
试剂盒提供的FastAlteration DNA Polymerase是一种快速高保真DNA聚合酶,该酶保真性能优良,灵敏度高,扩增速度可达15~30 sec/kb,并且zuì高可扩增长度为10 kb的质粒DNA。试剂盒附带的FDM感受态细胞具有体内降解甲基化质粒的功能,可以对未被Dpn I降解掉的质粒模板进行进一步的降解,因此可以保证试剂盒具有更高的阳性率。同时,本试剂盒还为客户提供了对照质粒和引物,方便客户查找实验问题。
产品特点:
·简便快速:试剂盒采用非链取代式质粒扩增技术,只需4步即可实现由非突变菌株到突变菌株的转变,而不需要多轮PCR及亚克隆等耗时耗力的步骤。
·高效引物:试剂盒采用部分重叠的引物设计原则,可以扩增得到更多的突变质粒。
·应用广泛:本试剂盒不但可进行单点突变,还可以进行多点突变,且突变点数可达5个。
·适应性强:本试剂盒zuì大可对10 kb的质粒进行定点突变,基本覆盖所有常用质粒。
·突变率高:本试剂盒具有体外和体内双重消化甲基化质粒模板的功能,可以保证更高的突变率。对于单点突变而言,本试剂盒的突变率可达90%以上。
适用范围:
·改造优化目的基因和载体;
·分析启动子上与调控蛋白结合的关键位点;
·研究蛋白质结构和功能之间的关系。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| FastAlteration DNA Polymerase(1U/μl) | 20μl |
| 5× FastAlteration Buffer | 200μl |
| Dpn I restriction enzyme(20U/μl) | 20μl |
| 4.5 kb Control plasmid(5ng/μl) | 40μl |
| Control primers(5μM,each) | 80μl |
| FDM competent cells | 20×50μl |
储存条件:于-20℃条件下保存。感受态细胞-70℃条件下保质期6个月,试剂盒其他组分在-20℃条件下保质期1年。
注意事项
1.在进行单引物多位点突变时,由于增加了突变位点个数,所以突变率较单点突变时会有所降低,根据我们的实验数据,当突变位点个数达到5个时,突变阳性率会降低到50%。因此建议客户要增加验证的克隆子数。
2.本试剂盒支持多引物多位点突变,这样可以在基因内更广泛的范围内进行突变实验。突变位点个数的上限仍然是5个。
3.建议在进行新的突变实验时要带上试剂盒附带的对照质粒和引物,以便于对实验问题进行分析。
除了快速定点突变试剂盒,,我公司还供应以下相关产品:
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文献和实验♦ 适用范围:适用于快速提取植物组织细胞总RNA本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。♦ 储存事项:1. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。2. 不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。♦ 产品介绍:独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶,反应10分钟。平滑末端连接:在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时,或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外,NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1:在25°C条件下,用1 unit(1:400稀释后取1 µl)T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
以下操作按照天根产品 DP330 石蜡包埋组织 DNA 快速提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
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