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- 详细信息
- 技术资料
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292
- 英文名:
Tth DNA Polymerase
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
Tth DNA聚合酶哪里卖的品牌:百奥莱博,是优质的工具酶产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Tth DNA聚合酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:Tth DNA聚合酶哪里卖
品牌:百奥莱博
规格:250U
产地:国产|进口
英文名:Tth DNA Polymerase
本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下,具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应,但耐热性比Taq酶高,因此对高GC含量模板的PCR 也有较好的效果。本酶基本上没有3´→5´外切酶活性及5´→3´外切酶活性,所以也可用于双脱氧法测序。另外,本酶具有RTase活性,在Mn2+存在的情况下,RTase活性会得到强化。利用该特性,可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应,即一步法RT PCR。(但是,在Mn2+存在时,RT-PCR的准确性不高)此外,本酶与Taq DNA多聚酶一样,PCR产物可通过T载体进行TA克隆。
产品特点:
1.RT-PCR反应的特异性增加:在较高的温度下进行逆转录,增加了引物杂交和延伸的特异性。
2.二级结构减少:在较高的温度下进行逆转录,减少了由于RNA二级结构引起的问题。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 50μl |
| 10×Tth Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
以λDNA为模板,以10×Tth Buffer(+MgCl2)作为缓冲液进行体积为50μL的PCR扩增反应为例
1.按下列组份配制PCR反应液。
| 成分 | 终浓度 | 用量 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 1.25U | 0.25μl |
| 10×Tth Buffer(+MgCl2) | 1× | 5μl |
| dNTP Mixture(各2.5mM) | 各0.2mM | 4μl |
| 模板DNA | 50pg~1μg | 详见下表 |
| 引物1(10μM) | 0.1~1μM | 最多到1μL |
| 引物2(10μM) | 0.1~1μM | 最多到1μL |
| 灭菌蒸馏水 | 加到50μL |
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量:
| 哺乳动物基因组DNA | 0.5~1μg |
| 酵母基因组DNA | 5~500ng |
| 细菌基因组DNA | 0.5~50ng |
| 质粒DNA | 5~500pg |
| PCR回收片段 | 1~100pg |
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
1.循环测序:该酶为耐热性酶,可通过与PCR 同样的温度条件进行测序反应。由于其高温稳定性好,对于复杂高级结构的模板效果较好。
2.引物:用于耐热性酶测序的引物需比用于非耐酶测序的引物设定更长的时间。采用较短的引物时,可能会出现不能获得条带变淡的情况。
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Tth DNA聚合酶哪里卖关键词:Tth DNA Polymerase,BTN90501,Tth DNA聚合酶
·核酸清除剂
编号:BTN81216
英文名称:Nucleic Acid Scavenger
规格:1.5mL
本产品用于去除蛋白样品中的核酸污染。蛋白双向电泳的关键是制备好的样品,其中包括核酸的清除,因为核酸能与蛋白质结合,影响聚焦。同时,核酸的分子量大,容易堵塞凝胶,造成条带拖尾。此外,如果使用银染的方法检测蛋白质,污染的核酸也会被染色,为此我司开发了本产品。
产品特点:
1. 使用简单,加入样品中简单保温即可。
2. 效率高,10分钟内可以清除核酸(DNA和RNA)对蛋白质电泳的干扰。
3.基于酶学消化,所以会引入DNase和RNase。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在样品中加入0.1倍体积的本产品,轻柔混匀。
2.在冰上保温10-30分钟,使核酸降解成单核苷酸或寡核苷酸。
注意事项:
这两种酶也有可能在双向电泳图谱呈现蛋白斑点。用超离心方法也能除去核酸,但也可能除去大片分子质量的蛋白质,在低离子强度时,带负电的核酸和带正电的蛋白质会形成复合物,所以用高pH和高离子强度的溶液能减少这种反应,单最后还必需去盐。
·DNase I溶液
编号:BTN130984
英文名称:DNase I Solution
规格:1.5mL
本产品是DNase I的10mg/mL的溶液,酶活性为1500-2500U/mg。DNase I从牛胰腺纯化得到是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶,分子量约32kDa(单体)。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5´端为磷酸基团,3´端为羟基。其活性依赖于*离子,并能被*离子或二价锰离子激活。*离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
产品特点:
1.即开即用,不需要用户单独配置。
2.可用于制备RNase-free的DNase。本产品为粗制品,可能含残留的RNase,不能直接用于清除RNA样品中的DNA。
3.本产品可直接用于DNase I Footprinting实验、缺口平移(Nick Translation)、制备DNA随机片断文库、制备TUNEL检测中的阳性对照。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
本产品可用于DNase I Footprinting实验、缺口平移(Nick Translation)、制备DNA随机片断文库、TUNEL检测中剪切基因组DNA作为阳性对照。具体使用方法请参考相关资料。
注意:本产品浓度较高,如需对其进行稀释,需要自备DNase I储存液。
DNase I储存液的配方:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl₂,50%(v/v)甘油。
附录:
1.DNase I活性定义:37℃10分钟内,将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。
2.DNase I活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA。
3.纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶。
4.DNase I酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)甘油。
5.DNase I酶反应液(10×):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2。
6.失活或抑制:加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚*仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子、0.1%的SDS、DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。
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