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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
柱式土壤 RNAout
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50 次
1)柱式土壤 RNAout50 次费用客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
以下是柱式土壤 RNAout50 次费用的详细介绍点击了解更多RNA纯化产品:

储存事项:
A. 柱式土壤 RNAout50 次费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 柱式土壤 RNAout50 次费用组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤:
(1) 柱式土壤 RNAout50 次费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
DNA 尿素 -PAGE 上样液1.5mL 噻孢霉素溶液 ,100mg/mL1mL
DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL 软骨 RNAout50 次
DNA 非变性 PAGE 上样液1.5mL 乳腺上皮细胞生长因子5mL
DNA 非变性 PAGE 上样液10mL 溶壁酶干粉1g
电泳级 SYBR Green I50μL 人肿瘤细胞分离液 1.055200mL
柱式血清血浆 DNAout50 次 一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次
血液和 DNA 纯化套装100 次 一站式 Tricine-SDS-PAGE 套装30 次
大提柱式血液 DNAout4次 一站式 TA 克隆试剂盒20 次
百万碱基级血液 DNAout10 次 一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次
Southern 级血液 DNAout10 次 一站式 SDS-PAGE 电泳套装30 次
一站式 DNA 非变性 PAGE 电泳套装30 次 水饱和10mL
超快核酸电泳液干粉 20L 水饱和酚100mL
超快核酸电泳液干粉 50L 双脱氧 dNTP 套装40uL×4
TAE 电泳液 ,50×250mL 双酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次
TAE 电泳液 ,50×2500mL 石蜡油,PCR 级10mL
碱性蛋白胨水管(10ml) 英文名称; Alkaline peptone water 规格; 10ml*20
营养肉汤管(含棉签) 英文名称; 规格; 10ml*20支/包
0.9%无菌氯化钠溶液管 英文名称; 规格; 9ml*20支/包
硫乙醇酸盐流体培养基管 英文名称; 规格; 7.5ml*20支/盒
沙氏葡萄糖液体培养基管 英文名称; 规格; 10ml*20支/包
细菌总数显色培养基 Total Genes Chromogenic Medium 250g
O157显色培养基 O157 chromogenic medium 1000(ML)
沙门氏菌显色培养基 Salmonella Chromogenic Medium 1000(ML)
李斯特氏菌显色培养基 Listera Chromogenic Medium 1000(ML)
金黄色葡萄球菌显色培养基 Staphylococcus Chromogenic Medium 1000(ML)
柱式土壤 RNAout50 次费用乳糖蛋白胨培养液 用于饮用水,水源水中总大肠菌群的测定用途用于饮用水,水源水中总大肠菌群的测定成分(g/L)蛋白胨 10.0g牛肉浸膏 3.0g乳糖 5.0g氯化钠 5.0g溴紫 0.016gPH值 7.3-7.5※请放置阴凉干燥处保存用 法称取本品 2.3克,加热溶解于100ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的20mm×150mmm试管中,每管10ml,115℃高压灭菌20分钟备用。
肠道菌增菌肉汤(EE) 用于肠道菌的增菌培养(GB标准)用途用于肠杆菌科细菌的增菌培养。用 法称取本品45克,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶100ml,100℃加热30分钟,迅速在流动的冷水中冷却,无需高压灭菌。质量控制和典型特征本培养基配制好后为绿色液体,接种10-100个大肠杆菌于36±1℃培养18-24h,应生长良好。
LB肉汤 用于分子生物学中大肠杆菌的培养用途用于细菌增菌培养。成分(g/L)蛋白胨 10.0g酵母粉 5.0g氯化钠 10.0gPH值 7.0±0.1用 法称取本品2.5克,溶解于100ml蒸馏水中, 121℃高压灭菌15分钟备用。
LB营养琼脂 用于分子生物学中大肠杆菌的培养用途用于发酵工程、基因工程和分子生物学中大肠杆菌的培养。成分(g/L)胰蛋白胨 10.0g酵母浸粉 5.0g氯化钠 10.0g琼脂 15.0gPH值 7.0±0.2用 法称取本品4克,溶解于100ml蒸馏水中, 121℃高压灭菌15分钟,备用。质量控制和典型特征接种10-100个大肠杆菌JM109、HB101在36±1℃培养18-24小时,生长明显。
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文献和实验一、DNA 提取 SDS 高盐法(方案1) 具体步骤: 称取1 g 土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨;再倒入适量的液氮,研磨,重复3 次,使土壤颗粒研成粉末; 将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐[pH = 8.0 ] ,0.1 mol/L EDTA [pH 8.0 ] ,0.1 mol/L Tris-HCl [pH 8.0 ] ,1.5 mol/L NaCl ,1.0 % CTAB) 和50μl蛋白酶K(10 g/L ) 与5 g 土壤置于50 ml
SDS 高盐法(方案1) 具体步骤:称取1g 土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨;再倒入适量的液氮,研磨,重复3 次,使土壤颗粒研成粉末;将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐[pH = 8.0 ] ,0.1 mol/L EDTA [pH 8.0 ] ,0.1 mol/L Tris-HCl [pH 8.0 ] ,1.5 mol/L NaCl ,1.0 % CTAB) 和50μl蛋白酶K(10 g/L ) 与5 g 土壤置于50 ml 的离心管中,放入37 ℃恒温
,3 000 r/min离心1 min; (3) 结合Sephadex柱和PVPP柱:取100 μL粗DNA样品,经PVPP柱10 000 r/min离心1 min,再经Sephadex柱3 000 r/min离心1 min; (4) 商品纯化柱:使用3S DNA Purification Kit纯化柱,将100 μL粗DNA以PCR产物方式按照说明进行纯化,必要时使用BS缓冲液反复漂洗2~3次,30 μL ddH2 O回收。 0.8%琼脂
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