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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
25
- 英文名：
BLOTTO 溶液
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100mL
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
点击了解更多探针标记及检测产品：
BLOTTO 溶液100mL说明书详细介绍：
操作步骤:
1. BLOTTO 溶液100mL说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是BLOTTO 溶液100mL说明书的相关产品：
莫匹罗星,假单胞菌酸12650-69-0质量规格：>920U/MG,USP
匹伐他汀叔丁酯586966-54-3质量规格：>97%
多烯紫杉醇无水/多西他赛114977-28-5质量规格：purity>99.0%,BR
多烯紫杉醇无水/多西他赛（标准品）114977-28-5质量规格：HPLC>99%,标准品
多烯紫杉醇三水合物148408-66-6质量规格：含量>99.0%
芸香柚皮苷(标准品)Narirutin质量规格：HPLC≥98%，标准品
泽泻醇B醋酸酯(标准品)Alisol B 23-acetate质量规格：HPLC≥98%，标准品
獐牙菜苷（标准品）Sweroside质量规格：HPLC≥98%，标准品
獐牙菜苦苷(标准品)Swertiamarin质量规格：HPLC≥98%，标准品
樟脑（标准品）Camphor质量规格：HPLC≥96%，标准品
吲哚乙酸酯质量规格：0.97Indoxyl acetate
α-环糊精质量规格：>98%,BRα-Cyclodextrin
黄嘌呤氧化酶(XOD)质量规格：BR，>7U/MG, powderXanthine Oxidase from bovine milk
酰化酶,L-氨基酰化酶质量规格：酶活力≥30000u/gAcylase from Aspergilus sp.
胰蛋白酶1:250质量规格：>250U/mg,BRTrypsin 1:250 fromPorcine pancreas
白黄链霉菌 葱头伯克氏菌
泛养副球菌 黄绿绿僵菌 生物防治用菌。
金黄色葡萄球菌ATCC43300冻干粉 绿色木霉=木素木霉 产纤维素酶。
拟康氏木霉 金龟子绿僵菌小孢变种 生物防治
粗糙链孢霉 坏死梭杆菌坏死亚种
潮湿纤维单胞菌 雅致放射毛霉=葡匐放射毛霉
鲜橙曲霉 绿脓假单胞菌(绿脓杆菌)
铜绿假单胞菌冻干粉 灰黄青霉
尿肠球菌 苏云金芽胞杆菌以色列亚种Bacillusthuringiensissubsp.israelensis
粪肠球菌(粪链球菌) 缓冲蛋白胨水9ml 30 支/盒
BLOTTO 溶液100mL说明书顶青霉 肺形侧耳、柳树菌、树窝
大肠杆菌Escherichiacoli 弯曲芽孢杆菌
改良月桂基盐胰蛋白胨肉汤-万古酶素10ml 30 支/盒 总状毛霉
平盖灵芝(树舌) 0.1%蛋白胨水溶液100ml
食酸菌 水螺菌
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文献和实验蔗糖水溶液的密度 g/mL ( 摘自 P.Honig: "Principles of Sugar Technology" Vol.I, p31 ) 克蔗糖/100克溶液 0℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 40℃ 50℃ 60℃ 0 0.99987 0.99973 0.99913 0.99823 0.99707 0.99567 0.99232 0.98813 0.98330 5 1.02033 1.01960 1.01884 1.01785 1.01661
的溶液 。 设标准 管 8 管， 每 管加入标本稀释液 30 0ul 。在第一管中加入 8000p g/ml 的标准品溶液 3 00ul 混匀后用加样器吸出 3 00ul ，移至第二 管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 3 00ul 弃去。第八 管 为空白对照。 3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。 4. 洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸
1 0倍）。 细胞培养上清可以不做稀释直接检测。 2. 标准品液配制：使用前加入6ml 蒸馏水 混匀，配成 1 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，第一管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在第一管中加入 1 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二 管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。 3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作
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