- ￥220 - 30825
- MCLAB
- 美国
- SBUF-100
- 2025年07月15日
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大量
- 规格：
1 ml / 28 ml / 233 ml
| 规格： | 1 ml | 产品价格： | ￥220.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 28 ml | 产品价格： | ￥4145.0 |
| 规格： | 233 ml | 产品价格： | ￥30825.0 |
电话: +86-010-62698317 QQ: 1901868315 邮箱:icloning@icloning.cn
理想用于DNA测序。仅供研究用。
概述
5倍的测序缓冲液在不影响测序的准确性和读序长度的情况下能够降低测序成本。该缓冲系统能使用较少的染料中止剂混合液
应用
DNA测序
保存温度
-20°C
推荐反应步骤
⑴将5倍的测序缓冲液解冻并旋转片刻
⑵提前把5倍的测序缓冲液通过加入等量的水稀释成2.5倍的测序缓冲液
⑶通过下列操作进行测序反应（10 µL r×n）:
① 加入中止剂混合液0.25µL
② 加2.5倍的测序缓冲液3.75 µL
③ 加模板（浓度为100-500 ng/µL）1µL
④ 加引物（浓度为3 pmol/µL）1µL
⑤ 加水4µL。
⑷根据下 列方案进行循环反应
30 秒, 96°C => 15 秒, 50°C => 4分钟, 60°C => 25个循环
注意：1. 根据使用者的需求，可以把5倍浓度的测序缓冲液浓缩成高浓度或者稀释成各种不同浓度的与反应液。
2. 对于不同的操作者来说，其他条件下也可能运行得很好，在我们实验室已经有对于多样品，应用减少体积和降低中止剂混合液的浓度来实现
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- 内容
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文献和实验Inverse PCR & Cycle Sequencing
1) Mix the following in 200 ul PCR tubes: ABI BigDye Mix 3.0 ul PCR Template 2.5 ul Primer (1 uM) 1.5 ul 5X ABI dilution buffer 1.5 ul ddH2 O 6.5 ul 2) Cycle Sequence in a Perkin-Elmer 9700
DNA Methylation Analysis by Bisulfite Sequencing (BS)
system. Add 50 µL of buffer 5 (at 65ºC) Shake for 1 h Transfer to a flat-bottomed 96-well plate. Using the purified recombinant plasmid DNA as templates, perform a cycle-sequencing reaction using the BigDye
Inverse PCR Cycle Sequencing of P Element Insertions for STS Generation
by Garson Tsang of BDGP (garson@fruitfly.berkeley.edu). Currently, we are using ABI 377XL Automated Sequencers, FMC Bioproducts Long Ranger gel solution (P/N 50611), and the Perkin Elmer ABI BigDye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction Kit (P/N 4303154
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