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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
动物 RNAout(TRIzol)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
250mL
1)动物 RNAout(TRIzol) 250mL规格客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
以下是动物 RNAout(TRIzol) 250mL规格的详细介绍点击了解更多RNA纯化产品:

储存事项:
A. 动物 RNAout(TRIzol) 250mL规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 动物 RNAout(TRIzol) 250mL规格组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤:
(1) 动物 RNAout(TRIzol) 250mL规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Actin-Tracker Green( 微丝绿色荧光探针 )0.2mL DNA 非变性 PAGE 上样液1.5mL
BCECF AM1mg DNA 电泳分子量标准 200-1500 bp)50 次
Calcein100mg DNA 电泳分子量标准 (50-500 bp)50 次
Calcein Blue 250mg DNA 电泳分子量标准 (300-10000 bp)50 次
Calcein M 100mg DNA 电泳分子量标准 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次
大提柱式细菌 RNAout5次 柱式内毒素清除剂1.5mL
一管式病毒 RNAout50 次 柱式毛发 DNAout50 次
一管式病毒 RNAout200 次 柱式昆虫 RNAout50 次
柱式病毒 RNAout50 次 柱式昆虫 mtDNAout,测序级10 次
柱式病毒 RNA-DNA 双提试剂盒50 次 柱式昆虫 DNAout50 次
柱式软体 RNAout50 次 柱式血液 DNA-RNAout50 次
柱式粪便 RNAout50 次 柱式血液 DNAout50 次
植物 RNAout50 次 柱式血液 DNAout200 次
柱式植物 RNAout50 次 柱式血清血浆 RNAout50 次
柱式植物 RNAout 2.050 次 柱式血清血浆 DNAout50 次
大肠杆菌显色培养基 英文名称; E.Coli Chromogenic Medium 规格; 1000(ML)
大肠菌群显色培养基 英文名称; Coliform Chromogenic Medium 规格; 1000(ML)
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代) 英文名称; E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 规格; 1000(ML)
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(平皿) 英文名称; 规格; 9CM平皿
TBX培养基 英文名称; TBX Agar 规格; 1000(ML)
原材料系列
胰蛋白胨 Tryptone 250g
酪蛋白胨 Peptone from Casein 250g
牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250g
细菌琼脂粉 Agar Bacteriological 250g
动物 RNAout(TRIzol) 250mL规格液体硫乙醇酸盐培养基颗粒 用于药品,生物制品无菌试验,用于需氧菌、厌氧菌的培养用途:用于药品、生物制品无菌检测,检测好氧菌和厌氧菌。成分(g/L)酪胨(胰酶水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸钠 0.5L-胱氨酸 0.5氯化钠 2.5刃天青 0.001琼脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃
硫乙醇酸盐流体培养基颗粒 用于药品,生物制品无菌试验,用于需氧菌、厌氧菌的培养用途:用于药品、生物制品无菌检测,检测好氧菌和厌氧菌。成分(g/L)酪胨(胰酶水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸钠 0.5L-胱氨酸 0.5氯化钠 2.5刃天青 0.001琼脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃
麦康凯肉汤USP颗粒 用于肠道致病菌的增菌培养用于肠道致病菌的增菌培养
玫瑰红钠琼脂培养基颗粒 用于霉菌、酵母菌计数用途:用于霉菌和酵母菌计数。成分(g/L)蛋白胨 5.0磷酸二氢钾 1.0玫瑰红钠 0.0133镁 0.5葡萄糖 10.0琼脂 14.0pH值6.0 ± 0.2 25℃
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文献和实验Fractionation of Nuclear and Cytoplasmic RNA by Trizol--分别
. Resuspend the cells with 100μl ice cold TD by pipetting up and down 10 times. Add 100μl VRC/1%NP-40/TD. Vortex 5 second and put on ice. VRC/1%NP-40/TD: 2.4 ml 1%NP-40/TD 125ul VRC 4.8 ml 1%NP-40/TD 250μl VRC 5: Keep on ice for 5 min, vortex
抽提等等)。] 实验所需但试剂未提供的物品: * 酒精 * 0.1 M柠檬酸钠(用10%酒精配制) * 75%酒精 8 mM NaOH 如无例外,以下操作均应在15―30℃下完成。 1.DNA 的沉淀 移除中间层上残余的水样层,用酒精从中间层和苯酚层中沉淀DNA 。按最初匀浆化时每1 ml TRIZOL加0.3 ml的无水乙醇,反复颠倒来混合样品。然后将样品置于15―30℃下2―3分钟,再在2―8℃下以不超过2,000×g的离心力离心5分钟沉淀DNA
(颜色变白的哦),并用钳子固定。5. 解开右心耳,同时开启灌注泵。注意,不要随便揭开心脏的其他部位,否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功,尤其肺水肿。6. 将 4 度的生理盐水(最好已动物的肝脏发白为标准,我们实验室的大鼠约用 250ml)和多聚甲醛(根据所取得材料而定)依次灌入。7. 整个过程均应将动物放在冰上,以便于最大程度的保存目的蛋白和酶的活性。
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